中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
5期
853-858
,共6页
侯俊娜%罗益锋%王杜娟%杨惠玲%郭禹标
侯俊娜%囉益鋒%王杜娟%楊惠玲%郭禹標
후준나%라익봉%왕두연%양혜령%곽우표
巨噬细胞抑制因子%小干扰RNA%肺肿瘤
巨噬細胞抑製因子%小榦擾RNA%肺腫瘤
거서세포억제인자%소간우RNA%폐종류
目的:研究小干扰RNA(siRNA)阻断巨噬细胞抑制因子(MIF)基因表达对大细胞肺癌细胞株H460细胞增殖的抑制效应并探讨其抑瘤机制.方法:在体外培养的H460细胞中,采用免疫荧光法观测siRNA转染效率,Western blotting检测MIF蛋白的表达,MTT法和平板克隆形成实验检测 MIF siRNA对H460细胞活性和增殖的抑制作用,Hoechst染色出现后荧光显微镜观测转染后细胞的形态学变化,流式细胞仪观测细胞凋亡.结果:与阴性对照组相比,siRNA能有效阻断MIF蛋白的表达,显著抑制H460细胞活性及增殖能力(P<0.05);Hoechst染色可见转染MIF siRNA后的H460细胞出现典型的凋亡形态学改变;流式细胞术结果显示转染MIF siRNA1和MIF siRNA2后细胞凋亡较阴性对照组显著增加[ (18.09±0.41)% 和(23.38±2.67)% vs (5.87±1.05)%,P＜0.05].结论:MIF在大细胞肺癌的发生发展过程中发挥着重要作用,siRNA阻断MIF蛋白表达,可抑制H460细胞增殖,提示其极有可能成为肺癌的新治疗靶点.
目的:研究小榦擾RNA(siRNA)阻斷巨噬細胞抑製因子(MIF)基因錶達對大細胞肺癌細胞株H460細胞增殖的抑製效應併探討其抑瘤機製.方法:在體外培養的H460細胞中,採用免疫熒光法觀測siRNA轉染效率,Western blotting檢測MIF蛋白的錶達,MTT法和平闆剋隆形成實驗檢測 MIF siRNA對H460細胞活性和增殖的抑製作用,Hoechst染色齣現後熒光顯微鏡觀測轉染後細胞的形態學變化,流式細胞儀觀測細胞凋亡.結果:與陰性對照組相比,siRNA能有效阻斷MIF蛋白的錶達,顯著抑製H460細胞活性及增殖能力(P<0.05);Hoechst染色可見轉染MIF siRNA後的H460細胞齣現典型的凋亡形態學改變;流式細胞術結果顯示轉染MIF siRNA1和MIF siRNA2後細胞凋亡較陰性對照組顯著增加[ (18.09±0.41)% 和(23.38±2.67)% vs (5.87±1.05)%,P＜0.05].結論:MIF在大細胞肺癌的髮生髮展過程中髮揮著重要作用,siRNA阻斷MIF蛋白錶達,可抑製H460細胞增殖,提示其極有可能成為肺癌的新治療靶點.
목적:연구소간우RNA(siRNA)조단거서세포억제인자(MIF)기인표체대대세포폐암세포주H460세포증식적억제효응병탐토기억류궤제.방법:재체외배양적H460세포중,채용면역형광법관측siRNA전염효솔,Western blotting검측MIF단백적표체,MTT법화평판극륭형성실험검측 MIF siRNA대H460세포활성화증식적억제작용,Hoechst염색출현후형광현미경관측전염후세포적형태학변화,류식세포의관측세포조망.결과:여음성대조조상비,siRNA능유효조단MIF단백적표체,현저억제H460세포활성급증식능력(P<0.05);Hoechst염색가견전염MIF siRNA후적H460세포출현전형적조망형태학개변;류식세포술결과현시전염MIF siRNA1화MIF siRNA2후세포조망교음성대조조현저증가[ (18.09±0.41)% 화(23.38±2.67)% vs (5.87±1.05)%,P＜0.05].결론:MIF재대세포폐암적발생발전과정중발휘착중요작용,siRNA조단MIF단백표체,가억제H460세포증식,제시기겁유가능성위폐암적신치료파점.
