实验室研究与探索
實驗室研究與探索
실험실연구여탐색
LAABORATORY REESEARCH AND EXPLORATION
2011年
7期
37-40,161
,共5页
李立群%王小利%郑锦娟%李学军
李立群%王小利%鄭錦娟%李學軍
리립군%왕소리%정금연%리학군
聚合酶链式反应%反应体系%琼脂糖凝胶电泳
聚閤酶鏈式反應%反應體繫%瓊脂糖凝膠電泳
취합매련식반응%반응체계%경지당응효전영
研究聚式酶链式反应(PCR)实验中影响其扩增效果的多种因素,寻求反应体系中理想的各因素浓度配比.选取含5+10优质亚基的小麦品种为材料,以特异扩增1DX5基因PCR实验为例,从模板DNA、引物终浓度、Taq酶、二价镁离子、4dNTPs混合液、缓冲液浓度几方面入手,通过设计梯度实验,研究不同因素对PCR扩增效果的影响.结果表明,反应体系6个基本因素,缺少任何1个都扩增不出产物.在反应总体积25 μL的PCR反应体系中,模板DNA选用32 ng/μL,Mg2+终浓度2 mmol/L,Taq酶1.2 U/25μL,引物0.8μmol/lμL,4dNTPs0.3 mmol/L,缓冲液1×buffer最为合适,能扩增出理想的结果.
研究聚式酶鏈式反應(PCR)實驗中影響其擴增效果的多種因素,尋求反應體繫中理想的各因素濃度配比.選取含5+10優質亞基的小麥品種為材料,以特異擴增1DX5基因PCR實驗為例,從模闆DNA、引物終濃度、Taq酶、二價鎂離子、4dNTPs混閤液、緩遲液濃度幾方麵入手,通過設計梯度實驗,研究不同因素對PCR擴增效果的影響.結果錶明,反應體繫6箇基本因素,缺少任何1箇都擴增不齣產物.在反應總體積25 μL的PCR反應體繫中,模闆DNA選用32 ng/μL,Mg2+終濃度2 mmol/L,Taq酶1.2 U/25μL,引物0.8μmol/lμL,4dNTPs0.3 mmol/L,緩遲液1×buffer最為閤適,能擴增齣理想的結果.
연구취식매련식반응(PCR)실험중영향기확증효과적다충인소,심구반응체계중이상적각인소농도배비.선취함5+10우질아기적소맥품충위재료,이특이확증1DX5기인PCR실험위례,종모판DNA、인물종농도、Taq매、이개미리자、4dNTPs혼합액、완충액농도궤방면입수,통과설계제도실험,연구불동인소대PCR확증효과적영향.결과표명,반응체계6개기본인소,결소임하1개도확증불출산물.재반응총체적25 μL적PCR반응체계중,모판DNA선용32 ng/μL,Mg2+종농도2 mmol/L,Taq매1.2 U/25μL,인물0.8μmol/lμL,4dNTPs0.3 mmol/L,완충액1×buffer최위합괄,능확증출이상적결과.
