时珍国医国药
時珍國醫國藥
시진국의국약
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
2012年
1期
233-235
,共3页
燕丹%王坚%袁耀佐%王钿钿
燕丹%王堅%袁耀佐%王鈿鈿
연단%왕견%원요좌%왕전전
大蒜辣素%人肝癌HepG2细胞%多药耐药基因
大蒜辣素%人肝癌HepG2細胞%多藥耐藥基因
대산랄소%인간암HepG2세포%다약내약기인
目的 多药耐药(MDR)是肿瘤化疗的主要障碍,该研究旨在体外建立MDR人肝癌HepG2细胞株(HepG2/mdr),并探讨大蒜辣素(Allicin)对MDR1表达的影响.方法 采用高效液相色谱法(HPLC)提纯Allicin,采用间歇逐步增加阿霉素( adramycin,ADM)剂量法建立人肝癌MDR细胞株HepG2/mdr,运用细胞计数试剂盒(Cell counting kit-8,CCK -8)检测耐药细胞株耐药性,运用倒置显微镜观察不同浓度Allicin孵育下HepG2/mdr细胞形态学变化,运用逆转录聚合酶链反应( RT - PCR)及免疫印迹(Western blot)测定不同浓度Allicin作用下,HepG2/mdr细胞MDR1mRNA与蛋白表达情况.结果 Allicin经HPLC法提纯后其纯度达到99％.在2000nmol/L ADM作用下,HepG2/mdr细胞生长良好,而HepG2细胞生长停滞与死亡,且Allicin能阻止HepG2/mdr细胞生长,促进其死亡,随着Allicin浓度增加越加明显.Allicin能降低MDR1 mRNA和蛋白表达,呈现剂量依赖性.结论 成功建立人肝癌MDR细胞株HepG2/mdr,Allicin能通过抑制MRD1基因的表达,恢复肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.
目的 多藥耐藥(MDR)是腫瘤化療的主要障礙,該研究旨在體外建立MDR人肝癌HepG2細胞株(HepG2/mdr),併探討大蒜辣素(Allicin)對MDR1錶達的影響.方法 採用高效液相色譜法(HPLC)提純Allicin,採用間歇逐步增加阿黴素( adramycin,ADM)劑量法建立人肝癌MDR細胞株HepG2/mdr,運用細胞計數試劑盒(Cell counting kit-8,CCK -8)檢測耐藥細胞株耐藥性,運用倒置顯微鏡觀察不同濃度Allicin孵育下HepG2/mdr細胞形態學變化,運用逆轉錄聚閤酶鏈反應( RT - PCR)及免疫印跡(Western blot)測定不同濃度Allicin作用下,HepG2/mdr細胞MDR1mRNA與蛋白錶達情況.結果 Allicin經HPLC法提純後其純度達到99％.在2000nmol/L ADM作用下,HepG2/mdr細胞生長良好,而HepG2細胞生長停滯與死亡,且Allicin能阻止HepG2/mdr細胞生長,促進其死亡,隨著Allicin濃度增加越加明顯.Allicin能降低MDR1 mRNA和蛋白錶達,呈現劑量依賴性.結論 成功建立人肝癌MDR細胞株HepG2/mdr,Allicin能通過抑製MRD1基因的錶達,恢複腫瘤細胞對化療藥物的敏感性.
목적 다약내약(MDR)시종류화료적주요장애,해연구지재체외건립MDR인간암HepG2세포주(HepG2/mdr),병탐토대산랄소(Allicin)대MDR1표체적영향.방법 채용고효액상색보법(HPLC)제순Allicin,채용간헐축보증가아매소( adramycin,ADM)제량법건립인간암MDR세포주HepG2/mdr,운용세포계수시제합(Cell counting kit-8,CCK -8)검측내약세포주내약성,운용도치현미경관찰불동농도Allicin부육하HepG2/mdr세포형태학변화,운용역전록취합매련반응( RT - PCR)급면역인적(Western blot)측정불동농도Allicin작용하,HepG2/mdr세포MDR1mRNA여단백표체정황.결과 Allicin경HPLC법제순후기순도체도99％.재2000nmol/L ADM작용하,HepG2/mdr세포생장량호,이HepG2세포생장정체여사망,차Allicin능조지HepG2/mdr세포생장,촉진기사망,수착Allicin농도증가월가명현.Allicin능강저MDR1 mRNA화단백표체,정현제량의뢰성.결론 성공건립인간암MDR세포주HepG2/mdr,Allicin능통과억제MRD1기인적표체,회복종류세포대화료약물적민감성.
