生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2012年
2期
158-163
,共6页
武向梅%余华荣%卜友泉%易发平%汪长东%刘革力%苟小燕%邓小园%宋方洲
武嚮梅%餘華榮%蔔友泉%易髮平%汪長東%劉革力%茍小燕%鄧小園%宋方洲
무향매%여화영%복우천%역발평%왕장동%류혁력%구소연%산소완%송방주
Bmi-1基因%乳腺癌%RNA干扰%MCF-7细胞
Bmi-1基因%乳腺癌%RNA榦擾%MCF-7細胞
Bmi-1기인%유선암%RNA간우%MCF-7세포
B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1 (B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertion site 1,Bmi-1)基因是多梳基因家族成员,参与细胞增殖调控.研究发现Bmi-1基因可能参与肿瘤的形成,可能成为肿瘤潜在的治疗靶点.用RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Bmi-1基因表达观察其对乳腺癌细胞株MCF-7侵袭和转移等生物学特性的影响,以探讨Bmi-1在乳腺癌发生发展中的作用.PT67细胞包装质粒后产生的逆转录病毒感染MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选建立稳定细胞株,稳定抑制Bmi-1的细胞株命名为MCF-7/Bmi-1si.通过RT-PCR和Westemblot分别从mRNA和蛋白水平检测Bmi-1的表达量；平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell侵袭小室模型检测细胞体外侵袭和转移能力.MCF-7/Bmi-lsi组与MCF-7和MCF-7/GFPsi组相比,Bmi-1 mRNA和蛋白表达量明显减少,克隆形成数及形成率也明显减少(P＜0.05).侵袭和转移实验表明:与MCF-7和MCF-7/GFPsi组相比,MCF-7/Bmi-1 si组细胞在Transwell侵袭小室中24 h穿膜细胞数明显减少(P＜0.05).结果表明沉默Bmi-1基因表达稳定细胞株构建成功,Bmi-1基因表达的沉默能显著降低MCF-7细胞的体外增殖及侵袭转移能力.
B細胞特異性莫洛尼鼠白血病病毒插入位點1 (B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertion site 1,Bmi-1)基因是多梳基因傢族成員,參與細胞增殖調控.研究髮現Bmi-1基因可能參與腫瘤的形成,可能成為腫瘤潛在的治療靶點.用RNA榦擾(RNA interference,RNAi)沉默Bmi-1基因錶達觀察其對乳腺癌細胞株MCF-7侵襲和轉移等生物學特性的影響,以探討Bmi-1在乳腺癌髮生髮展中的作用.PT67細胞包裝質粒後產生的逆轉錄病毒感染MCF-7細胞,嘌呤黴素篩選建立穩定細胞株,穩定抑製Bmi-1的細胞株命名為MCF-7/Bmi-1si.通過RT-PCR和Westemblot分彆從mRNA和蛋白水平檢測Bmi-1的錶達量；平闆剋隆形成實驗檢測細胞剋隆形成能力;Transwell侵襲小室模型檢測細胞體外侵襲和轉移能力.MCF-7/Bmi-lsi組與MCF-7和MCF-7/GFPsi組相比,Bmi-1 mRNA和蛋白錶達量明顯減少,剋隆形成數及形成率也明顯減少(P＜0.05).侵襲和轉移實驗錶明:與MCF-7和MCF-7/GFPsi組相比,MCF-7/Bmi-1 si組細胞在Transwell侵襲小室中24 h穿膜細胞數明顯減少(P＜0.05).結果錶明沉默Bmi-1基因錶達穩定細胞株構建成功,Bmi-1基因錶達的沉默能顯著降低MCF-7細胞的體外增殖及侵襲轉移能力.
B세포특이성막락니서백혈병병독삽입위점1 (B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertion site 1,Bmi-1)기인시다소기인가족성원,삼여세포증식조공.연구발현Bmi-1기인가능삼여종류적형성,가능성위종류잠재적치료파점.용RNA간우(RNA interference,RNAi)침묵Bmi-1기인표체관찰기대유선암세포주MCF-7침습화전이등생물학특성적영향,이탐토Bmi-1재유선암발생발전중적작용.PT67세포포장질립후산생적역전록병독감염MCF-7세포,표령매소사선건립은정세포주,은정억제Bmi-1적세포주명명위MCF-7/Bmi-1si.통과RT-PCR화Westemblot분별종mRNA화단백수평검측Bmi-1적표체량；평판극륭형성실험검측세포극륭형성능력;Transwell침습소실모형검측세포체외침습화전이능력.MCF-7/Bmi-lsi조여MCF-7화MCF-7/GFPsi조상비,Bmi-1 mRNA화단백표체량명현감소,극륭형성수급형성솔야명현감소(P＜0.05).침습화전이실험표명:여MCF-7화MCF-7/GFPsi조상비,MCF-7/Bmi-1 si조세포재Transwell침습소실중24 h천막세포수명현감소(P＜0.05).결과표명침묵Bmi-1기인표체은정세포주구건성공,Bmi-1기인표체적침묵능현저강저MCF-7세포적체외증식급침습전이능력.
