西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2012年
5期
881-885
,共5页
院海英%吴祥辉%东锐%崔百明%黄先忠
院海英%吳祥輝%東銳%崔百明%黃先忠
원해영%오상휘%동예%최백명%황선충
GFP蛋白%拟南芥%小拟南芥%转基因
GFP蛋白%擬南芥%小擬南芥%轉基因
GFP단백%의남개%소의남개%전기인
以质粒pMCB30为模板,扩增GFP基因,连接到载体pCMBIA2300-35S-OCS上,构建过量表达载体p35S:GFP,将其转入农杆菌GV3101.通过农杆菌介导法将p35S:GFP载体分别转入新疆特色植物小拟南芥和拟南芥中.T0代经含有卡那霉素的1/2MS培养基筛选,获得了Tt代转基因小拟南芥2株,T1代转基因拟南芥9株.通过激光共聚焦显微镜观察,在转基因小拟南芥和拟南芥的根尖细胞中均可检测到GFP绿色荧光蛋白；对转基因植株进行PCR扩增,均可检测到GFP基因,表明GFP基因已成功转入小拟南芥和拟南芥中.该研究建立了小拟南芥的遗传转化体系,为进一步利用GFP基因和进一步研究小拟南芥的功能基因奠定基础.
以質粒pMCB30為模闆,擴增GFP基因,連接到載體pCMBIA2300-35S-OCS上,構建過量錶達載體p35S:GFP,將其轉入農桿菌GV3101.通過農桿菌介導法將p35S:GFP載體分彆轉入新疆特色植物小擬南芥和擬南芥中.T0代經含有卡那黴素的1/2MS培養基篩選,穫得瞭Tt代轉基因小擬南芥2株,T1代轉基因擬南芥9株.通過激光共聚焦顯微鏡觀察,在轉基因小擬南芥和擬南芥的根尖細胞中均可檢測到GFP綠色熒光蛋白；對轉基因植株進行PCR擴增,均可檢測到GFP基因,錶明GFP基因已成功轉入小擬南芥和擬南芥中.該研究建立瞭小擬南芥的遺傳轉化體繫,為進一步利用GFP基因和進一步研究小擬南芥的功能基因奠定基礎.
이질립pMCB30위모판,확증GFP기인,련접도재체pCMBIA2300-35S-OCS상,구건과량표체재체p35S:GFP,장기전입농간균GV3101.통과농간균개도법장p35S:GFP재체분별전입신강특색식물소의남개화의남개중.T0대경함유잡나매소적1/2MS배양기사선,획득료Tt대전기인소의남개2주,T1대전기인의남개9주.통과격광공취초현미경관찰,재전기인소의남개화의남개적근첨세포중균가검측도GFP록색형광단백；대전기인식주진행PCR확증,균가검측도GFP기인,표명GFP기인이성공전입소의남개화의남개중.해연구건립료소의남개적유전전화체계,위진일보이용GFP기인화진일보연구소의남개적공능기인전정기출.
