CAJ | 학술논문

目的研究生长分化因子-5(growth differentiation factor-5,GDF-5)对肢芽细胞分化的影响机制及在骨形成过程中的作用机制.方法取妊娠第12 d胎鼠肢芽,行肢芽细胞微团培养,以不同浓度(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml、120 ng/ml)重组鼠GDF-5,干预培养中的肢芽细胞.于细胞培养第1 d、3 d,用扫描电镜观察不同浓度GDF-5对肢芽细胞生长与分化的影响.于细胞培养第3 d,采用免疫组织化学和实时定量PCR等方法观察GDF-5对肢芽细胞核结合转录因子(Cbfa1)与X型胶原蛋白表达的影响.结果在细胞培养第1 d,扫描电镜观察结果显示,GDF-5可使肢芽细胞连接更为紧密,高浓度GDF-5组有成熟软骨基质和软骨结节形成,低浓度组也有软骨结节形成,该效应与GDF-5浓度呈正相关.在细胞培养第3 d,免疫组织化学检测结果显示,X型胶原蛋白表达以120 ng/ml浓度组最为广泛和强烈,0 ng/ml浓度组表达最弱,其表达趋势接近于Cbfa1的表达,表明GDF-5有促进肢芽细胞向成熟软骨方向分化的作用.实时定量PCR结果显示,GDF-5在mRNA水平同样促进Cbfa1表达,其促进作用呈剂量依赖效应.结论GDF-5通过上调Cbfa1和X型胶原蛋白表达的途径促进肢芽细胞向软骨分化和促进骨形成.
목적연구생장분화인자-5(growth differentiation factor-5,GDF-5)대지아세포분화적영향궤제급재골형성과정중적작용궤제.방법취임신제12 d태서지아,행지아세포미단배양,이불동농도(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml、120 ng/ml)중조서GDF-5,간예배양중적지아세포.우세포배양제1 d、3 d,용소묘전경관찰불동농도GDF-5대지아세포생장여분화적영향.우세포배양제3 d,채용면역조직화학화실시정량PCR등방법관찰GDF-5대지아세포핵결합전록인자(Cbfa1)여X형효원단백표체적영향.결과재세포배양제1 d,소묘전경관찰결과현시,GDF-5가사지아세포련접경위긴밀,고농도GDF-5조유성숙연골기질화연골결절형성,저농도조야유연골결절형성,해효응여GDF-5농도정정상관.재세포배양제3 d,면역조직화학검측결과현시,X형효원단백표체이120 ng/ml농도조최위엄범화강렬,0 ng/ml농도조표체최약,기표체추세접근우Cbfa1적표체,표명GDF-5유촉진지아세포향성숙연골방향분화적작용.실시정량PCR결과현시,GDF-5재mRNA수평동양촉진Cbfa1표체,기촉진작용정제량의뢰효응.결론GDF-5통과상조Cbfa1화X형효원단백표체적도경촉진지아세포향연골분화화촉진골형성.