CAJ | 학술논문

目的探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)及联合蛋白激酶Cα(protein kinase C alpha,PKC-α)抑制剂Go6976对小鼠肝癌(H22)细胞凋亡的影响.方法将处于对数生长期的H22细胞分成两组,每组分四部分,一组仅以不同浓度的TNF-α(0,20、40、60 ng/ml)处理,另一组TNF-α处理同时以Go6976(4.6 nmol/ml)抑制PKC-α活性,分别于4 h,8 h,16 h采用流式细胞仪检测小鼠肝癌细胞的凋亡率,Western blotting方法检测PKC-α和磷酸化PKC-α蛋白的表达情况.结果TNF-α(0、20、40、60 ng/ml)处理H22细胞4 h,细胞凋亡率分别为2.44%±0.31%、1.80%±0.32%、2.73%±0.14%、3.05%±0.78%,PKC-α和磷酸化PKC-α表达无显著改变;同时用TNF-α和Go6976处理H22细胞,凋亡率、PKC-α和磷酸化PKC-α的表达与单独使用TNF-α的结果相似.TNF-α处理8 h,细胞凋亡率分别为2.11%±0.43%、1.83%±0.31%、3.40%±0.47%、6.05%±0.78%,PKC-α及磷酸化PKC-α的表达随TNF-α浓度增加而上调;TNF-α处理同时抑制PKC-α活性,细胞凋亡率显著升高,分别为2.90%±0.39%、7.76%±0.35%、11.43%±1.05%、12.96%±2.44%,PKC-α和磷酸化PKC-α表达相应下调.仅以TNF-α处理或TNF-α处理同时抑制PKC-α活性16 h,其结果与8 h的结果基本一致;于Go6976抑制细胞PKC-α活性组,TNF-α 60 ng/ml时细胞凋亡率较TNF-α 40 ng/ml时有所下降,但坏死细胞的比例却明显升高.结论TNF-α上调PKC-α和磷酸化PKC-α表达;抑制PKC-α活性,显著增加TNF-α对H22细胞的细胞毒性.
목적탐토종류배사인자α(tumor necrosis factor α,TNF-α)급연합단백격매Cα(protein kinase C alpha,PKC-α)억제제Go6976대소서간암(H22)세포조망적영향.방법장처우대수생장기적H22세포분성량조,매조분사부분,일조부이불동농도적TNF-α(0,20、40、60 ng/ml)처리,령일조TNF-α처리동시이Go6976(4.6 nmol/ml)억제PKC-α활성,분별우4 h,8 h,16 h채용류식세포의검측소서간암세포적조망솔,Western blotting방법검측PKC-α화린산화PKC-α단백적표체정황.결과TNF-α(0、20、40、60 ng/ml)처리H22세포4 h,세포조망솔분별위2.44%±0.31%、1.80%±0.32%、2.73%±0.14%、3.05%±0.78%,PKC-α화린산화PKC-α표체무현저개변;동시용TNF-α화Go6976처리H22세포,조망솔、PKC-α화린산화PKC-α적표체여단독사용TNF-α적결과상사.TNF-α처리8 h,세포조망솔분별위2.11%±0.43%、1.83%±0.31%、3.40%±0.47%、6.05%±0.78%,PKC-α급린산화PKC-α적표체수TNF-α농도증가이상조;TNF-α처리동시억제PKC-α활성,세포조망솔현저승고,분별위2.90%±0.39%、7.76%±0.35%、11.43%±1.05%、12.96%±2.44%,PKC-α화린산화PKC-α표체상응하조.부이TNF-α처리혹TNF-α처리동시억제PKC-α활성16 h,기결과여8 h적결과기본일치;우Go6976억제세포PKC-α활성조,TNF-α 60 ng/ml시세포조망솔교TNF-α 40 ng/ml시유소하강,단배사세포적비례각명현승고.결론TNF-α상조PKC-α화린산화PKC-α표체;억제PKC-α활성,현저증가TNF-α대H22세포적세포독성.