临床神经病学杂志
臨床神經病學雜誌
림상신경병학잡지
JOURNAL OF CLINICAL NEUROLOGY
2006年
6期
425-428
,共4页
叶民%陈生弟%卢健%陆国强%梁梁%徐洁懿
葉民%陳生弟%盧健%陸國彊%樑樑%徐潔懿
협민%진생제%로건%륙국강%량량%서길의
神经营养因子%腺病毒%骨髓基质细胞%帕金森病
神經營養因子%腺病毒%骨髓基質細胞%帕金森病
신경영양인자%선병독%골수기질세포%파금삼병
目的 构建携带一种神经营养因子Neurturin(NTN)基因的腺病毒(Ad),使其在骨髓基质细胞(BMSCs)中表达.方法 采用分子克隆技术,构建携带NTN基因的Ad载体,用脂质体法转染、包装HEK293细胞,制备具有感染活性的Ad-NTN病毒粒子;用病毒上清液感染原代培养的大鼠BMSCs,并用免疫细胞化学方法检测阳性细胞.用Western Blot检测转染Ad-NTN的BMSCs细胞上清液.结果 经酶切鉴定和DNA测序,得到重组Ad-NTN,对被感染的HEK293细胞进行病毒滴度测定,每毫升病毒贮存液可达1×108.5 半数组织培养感染量(TCID50);将病毒贮存液感染BMSCs,获得了表达NTN的BMSCs,阳性率为65%.Western Blot 检测证实BMSCs上清液中出现特异性NTN条带.结论 重组Ad携带的NTN基因能够在BMSCs中表达.
目的 構建攜帶一種神經營養因子Neurturin(NTN)基因的腺病毒(Ad),使其在骨髓基質細胞(BMSCs)中錶達.方法 採用分子剋隆技術,構建攜帶NTN基因的Ad載體,用脂質體法轉染、包裝HEK293細胞,製備具有感染活性的Ad-NTN病毒粒子;用病毒上清液感染原代培養的大鼠BMSCs,併用免疫細胞化學方法檢測暘性細胞.用Western Blot檢測轉染Ad-NTN的BMSCs細胞上清液.結果 經酶切鑒定和DNA測序,得到重組Ad-NTN,對被感染的HEK293細胞進行病毒滴度測定,每毫升病毒貯存液可達1×108.5 半數組織培養感染量(TCID50);將病毒貯存液感染BMSCs,穫得瞭錶達NTN的BMSCs,暘性率為65%.Western Blot 檢測證實BMSCs上清液中齣現特異性NTN條帶.結論 重組Ad攜帶的NTN基因能夠在BMSCs中錶達.
목적 구건휴대일충신경영양인자Neurturin(NTN)기인적선병독(Ad),사기재골수기질세포(BMSCs)중표체.방법 채용분자극륭기술,구건휴대NTN기인적Ad재체,용지질체법전염、포장HEK293세포,제비구유감염활성적Ad-NTN병독입자;용병독상청액감염원대배양적대서BMSCs,병용면역세포화학방법검측양성세포.용Western Blot검측전염Ad-NTN적BMSCs세포상청액.결과 경매절감정화DNA측서,득도중조Ad-NTN,대피감염적HEK293세포진행병독적도측정,매호승병독저존액가체1×108.5 반수조직배양감염량(TCID50);장병독저존액감염BMSCs,획득료표체NTN적BMSCs,양성솔위65%.Western Blot 검측증실BMSCs상청액중출현특이성NTN조대.결론 중조Ad휴대적NTN기인능구재BMSCs중표체.
