生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
18-20
,共3页
丁鹏%方斌%梁布锋%何光源
丁鵬%方斌%樑佈鋒%何光源
정붕%방빈%량포봉%하광원
α-2b干扰素%毕赤酵母%pPIC9K%SDS-PAGE
α-2b榦擾素%畢赤酵母%pPIC9K%SDS-PAGE
α-2b간우소%필적효모%pPIC9K%SDS-PAGE
目的:采用基因工程手段构建基因工程菌表达α-2b干扰素.方法:根据毕赤酵母密码子嗜好性原理设计并合成α-2b干扰素基因序列,将其插入到毕赤酵母Pichia pastoris的分泌型表达质粒pPIC9K中,得到重组分泌表达质粒pPIC9K-IFNα-2b,并用电转化法转化P.pastoris GS115.筛选出整合型His+Muts菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子,经5d诱导表达后SDS-PAGE检测.结果:菌落PCR和序列测定结果显示重组表达质粒已成功构建,SDS-PAGE结果显示目的蛋白已成功表达.结论:在毕赤酵母中成功表达α-2b干扰素.
目的:採用基因工程手段構建基因工程菌錶達α-2b榦擾素.方法:根據畢赤酵母密碼子嗜好性原理設計併閤成α-2b榦擾素基因序列,將其插入到畢赤酵母Pichia pastoris的分泌型錶達質粒pPIC9K中,得到重組分泌錶達質粒pPIC9K-IFNα-2b,併用電轉化法轉化P.pastoris GS115.篩選齣整閤型His+Muts菌株,進一步用G418篩選穫得高拷貝轉化子,經5d誘導錶達後SDS-PAGE檢測.結果:菌落PCR和序列測定結果顯示重組錶達質粒已成功構建,SDS-PAGE結果顯示目的蛋白已成功錶達.結論:在畢赤酵母中成功錶達α-2b榦擾素.
목적:채용기인공정수단구건기인공정균표체α-2b간우소.방법:근거필적효모밀마자기호성원리설계병합성α-2b간우소기인서렬,장기삽입도필적효모Pichia pastoris적분비형표체질립pPIC9K중,득도중조분비표체질립pPIC9K-IFNα-2b,병용전전화법전화P.pastoris GS115.사선출정합형His+Muts균주,진일보용G418사선획득고고패전화자,경5d유도표체후SDS-PAGE검측.결과:균락PCR화서렬측정결과현시중조표체질립이성공구건,SDS-PAGE결과현시목적단백이성공표체.결론:재필적효모중성공표체α-2b간우소.
