CAJ | 학술논문

目的:研究体外生理浓度葡萄糖培养胰岛β细胞株NIT-l细胞在不同时间出现的功能变化及其可能机制.方法:观察5.6 mmol／L葡萄糖浓度的DMEM完全培养基培养的NIT-1细胞在8周培养时间内细胞的形态变化;胰岛素免疫细胞化学染色;应用放射免疫法测定8周葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平;并以RT-PCR半定量测定各基因Insulin、Glut2、GK、PDX-1、NeuroDl、Pax4、Pax6 mRNA表达水平变化.结果:(1)传代培养过程中细胞生长良好呈多边形,不同培养时间的NIT-1细胞形态无显著差异;(2)胰岛素免疫细胞化学染色示GSIS组胞浆染色阳性,呈淡黄褐色;(3)1-8周每周测定的葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSJS)与第1周数据比较,显示胰岛细胞分泌功能改变差异显著(P<0.05);(4)1-8周每周测定的胰岛素基因、PDX-l基因、GK基因、GIut2基因、Neu-roDl基因和Pax6基因mRNA的表达与第1周比较,显示基因mRNA的改变差异显著(P<0.05);Pax4基因mRNA的改变无显著差异(P>0.05).结论:生理浓度葡萄糖培养的NIT-l细胞的葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能随体外培养时间的延长呈逐步下降趋势;这可能与维持B细胞功能有关的基因Insulin、PDX-1、GK、Glut2、NeuroDl和Pax6表达下降有关.
목적:연구체외생리농도포도당배양이도β세포주NIT-l세포재불동시간출현적공능변화급기가능궤제.방법:관찰5.6 mmol／L포도당농도적DMEM완전배양기배양적NIT-1세포재8주배양시간내세포적형태변화;이도소면역세포화학염색;응용방사면역법측정8주포도당자격적이도소분비수평;병이RT-PCR반정량측정각기인Insulin、Glut2、GK、PDX-1、NeuroDl、Pax4、Pax6 mRNA표체수평변화.결과:(1)전대배양과정중세포생장량호정다변형,불동배양시간적NIT-1세포형태무현저차이;(2)이도소면역세포화학염색시GSIS조포장염색양성,정담황갈색;(3)1-8주매주측정적포도당자격적이도소분비(GSJS)여제1주수거비교,현시이도세포분비공능개변차이현저(P<0.05);(4)1-8주매주측정적이도소기인、PDX-l기인、GK기인、GIut2기인、Neu-roDl기인화Pax6기인mRNA적표체여제1주비교,현시기인mRNA적개변차이현저(P<0.05);Pax4기인mRNA적개변무현저차이(P>0.05).결론:생리농도포도당배양적NIT-l세포적포도당자격적이도소분비공능수체외배양시간적연장정축보하강추세;저가능여유지B세포공능유관적기인Insulin、PDX-1、GK、Glut2、NeuroDl화Pax6표체하강유관.