农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
4期
337-346
,共10页
惠麦侠%张鲁刚%余祥%王晗%白金娟%何玉科
惠麥俠%張魯剛%餘祥%王晗%白金娟%何玉科
혜맥협%장로강%여상%왕함%백금연%하옥과
白菜%BrcCUC3基因%NAC-domain%过表达%叶发育
白菜%BrcCUC3基因%NAC-domain%過錶達%葉髮育
백채%BrcCUC3기인%NAC-domain%과표체%협발육
植物NAC (矮牵牛NAM基因、拟南芥ATAF1/2和CUC2基因)转录因子CUP-SHAPED COTYLEDON(CUC)亚家族成员在植物茎尖分生组织形态建成、器官边界分离、叶发育方面发挥着重要作用.采用基因同源克隆的方法获得了白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)基因BrcCUC3,并转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)做了初步的功能鉴定.研究结果表明,白菜Brc CUC3的编码区长1 008 bp,编码335个氨基酸,基因结构分析显示BrcCUC3包含3个外显子、2个内含子,内含子剪接位点符合GT-AG规则.氨基酸序列分析表明,BrcCUC3蛋白具有典型的植物NAC domain结构域.BrcCUC3编码区氨基酸序列与其它植物的CUC3蛋白有很高的一致性,尤其与甘蓝(Brasica oleracea)、萝卜(Raphanus sativus)和拟南芥CUC3蛋白高度一致,一致性分别达到98%,97%和83%.在不同物种CUC3的系统进化树上,BrcCUC3归属于双子叶植物分支的十字花科亚组,由不同植物20条CUC3编码区氨基酸序列所建立的系统进化树与真实的植物进化基本一致.荧光定量PCR分析结果表明,BrcCUC3在白菜叶深裂株系叶片中的表达量比叶全缘叶片中的高.利用根癌农杆菌(A grobacterium tumefaciens)浸花法转化拟南芥,获得了转BrcCUC3基因的拟南芥植株.过表达BrcCUC3的转基因拟南芥呈现叶缘出现裂刻、主枝增加的新表型.初步说明该基因参与叶形和主枝的发育调控,为揭示白菜叶形发育分子调控机制和通过基因工程创制植物叶形新种质提供分子依据.
植物NAC (矮牽牛NAM基因、擬南芥ATAF1/2和CUC2基因)轉錄因子CUP-SHAPED COTYLEDON(CUC)亞傢族成員在植物莖尖分生組織形態建成、器官邊界分離、葉髮育方麵髮揮著重要作用.採用基因同源剋隆的方法穫得瞭白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)基因BrcCUC3,併轉化擬南芥(Arabidopsis thaliana)做瞭初步的功能鑒定.研究結果錶明,白菜Brc CUC3的編碼區長1 008 bp,編碼335箇氨基痠,基因結構分析顯示BrcCUC3包含3箇外顯子、2箇內含子,內含子剪接位點符閤GT-AG規則.氨基痠序列分析錶明,BrcCUC3蛋白具有典型的植物NAC domain結構域.BrcCUC3編碼區氨基痠序列與其它植物的CUC3蛋白有很高的一緻性,尤其與甘藍(Brasica oleracea)、蘿蔔(Raphanus sativus)和擬南芥CUC3蛋白高度一緻,一緻性分彆達到98%,97%和83%.在不同物種CUC3的繫統進化樹上,BrcCUC3歸屬于雙子葉植物分支的十字花科亞組,由不同植物20條CUC3編碼區氨基痠序列所建立的繫統進化樹與真實的植物進化基本一緻.熒光定量PCR分析結果錶明,BrcCUC3在白菜葉深裂株繫葉片中的錶達量比葉全緣葉片中的高.利用根癌農桿菌(A grobacterium tumefaciens)浸花法轉化擬南芥,穫得瞭轉BrcCUC3基因的擬南芥植株.過錶達BrcCUC3的轉基因擬南芥呈現葉緣齣現裂刻、主枝增加的新錶型.初步說明該基因參與葉形和主枝的髮育調控,為揭示白菜葉形髮育分子調控機製和通過基因工程創製植物葉形新種質提供分子依據.
식물NAC (왜견우NAM기인、의남개ATAF1/2화CUC2기인)전록인자CUP-SHAPED COTYLEDON(CUC)아가족성원재식물경첨분생조직형태건성、기관변계분리、협발육방면발휘착중요작용.채용기인동원극륭적방법획득료백채(Brassica rapa ssp.chinensis)기인BrcCUC3,병전화의남개(Arabidopsis thaliana)주료초보적공능감정.연구결과표명,백채Brc CUC3적편마구장1 008 bp,편마335개안기산,기인결구분석현시BrcCUC3포함3개외현자、2개내함자,내함자전접위점부합GT-AG규칙.안기산서렬분석표명,BrcCUC3단백구유전형적식물NAC domain결구역.BrcCUC3편마구안기산서렬여기타식물적CUC3단백유흔고적일치성,우기여감람(Brasica oleracea)、라복(Raphanus sativus)화의남개CUC3단백고도일치,일치성분별체도98%,97%화83%.재불동물충CUC3적계통진화수상,BrcCUC3귀속우쌍자협식물분지적십자화과아조,유불동식물20조CUC3편마구안기산서렬소건립적계통진화수여진실적식물진화기본일치.형광정량PCR분석결과표명,BrcCUC3재백채협심렬주계협편중적표체량비협전연협편중적고.이용근암농간균(A grobacterium tumefaciens)침화법전화의남개,획득료전BrcCUC3기인적의남개식주.과표체BrcCUC3적전기인의남개정현협연출현렬각、주지증가적신표형.초보설명해기인삼여협형화주지적발육조공,위게시백채협형발육분자조공궤제화통과기인공정창제식물협형신충질제공분자의거.