中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
8期
1392-1398
,共7页
刘春蕾%李鑫%李蕊君%何云云%何昆仑%王莉莉
劉春蕾%李鑫%李蕊君%何雲雲%何昆崙%王莉莉
류춘뢰%리흠%리예군%하운운%하곤륜%왕리리
心肌细胞%内质网应激%缺氧%未折叠蛋白反应%细胞凋亡
心肌細胞%內質網應激%缺氧%未摺疊蛋白反應%細胞凋亡
심기세포%내질망응격%결양%미절첩단백반응%세포조망
目的:观察缺氧对原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞的损伤,探讨内质网应激在缺氧心肌损伤发生发展过程中起的作用及PERK通路是否参与其信号转导过程.方法:将原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组和缺氧1 h、4 h、8 h、12 h、24 h组,通过测定细胞ATP含量反映细胞活力;高内涵分析细胞成像系统检测多参数凋亡;采用免疫细胞化学和蛋白印迹方法检测以内质网为靶点的分子伴侣(GRP78和钙网蛋白)的表达,PERK通路(PERK和eIF2α)的磷酸化水平,以及其下游分子(ATF4和CHOP)在缺氧不同时点蛋白的表达变化特征.采用PERK通路激活型药物salubrinal处理原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞,观察药物是否对缺氧损伤的心肌细胞有保护作用.结果:缺氧引起心肌细胞凋亡,缺氧早期(约1 h)钙网蛋白和GPR78的表达上调;缺氧中期(4 h)p-PERK、p-eIF2α和ATF4的表达上调;缺氧后期(12 h)CHOP的表达上调.Salubrinal对缺氧心肌有保护作用.结论:在培养的心肌细胞中,缺氧可激发内质网应激.在缺氧早期激活PERK通路保护机体对抗缺氧损伤,后期激活细胞凋亡通路.
目的:觀察缺氧對原代培養的Wistar乳鼠心肌細胞的損傷,探討內質網應激在缺氧心肌損傷髮生髮展過程中起的作用及PERK通路是否參與其信號轉導過程.方法:將原代培養的乳鼠心肌細胞隨機分為正常對照組和缺氧1 h、4 h、8 h、12 h、24 h組,通過測定細胞ATP含量反映細胞活力;高內涵分析細胞成像繫統檢測多參數凋亡;採用免疫細胞化學和蛋白印跡方法檢測以內質網為靶點的分子伴侶(GRP78和鈣網蛋白)的錶達,PERK通路(PERK和eIF2α)的燐痠化水平,以及其下遊分子(ATF4和CHOP)在缺氧不同時點蛋白的錶達變化特徵.採用PERK通路激活型藥物salubrinal處理原代培養的Wistar乳鼠心肌細胞,觀察藥物是否對缺氧損傷的心肌細胞有保護作用.結果:缺氧引起心肌細胞凋亡,缺氧早期(約1 h)鈣網蛋白和GPR78的錶達上調;缺氧中期(4 h)p-PERK、p-eIF2α和ATF4的錶達上調;缺氧後期(12 h)CHOP的錶達上調.Salubrinal對缺氧心肌有保護作用.結論:在培養的心肌細胞中,缺氧可激髮內質網應激.在缺氧早期激活PERK通路保護機體對抗缺氧損傷,後期激活細胞凋亡通路.
목적:관찰결양대원대배양적Wistar유서심기세포적손상,탐토내질망응격재결양심기손상발생발전과정중기적작용급PERK통로시부삼여기신호전도과정.방법:장원대배양적유서심기세포수궤분위정상대조조화결양1 h、4 h、8 h、12 h、24 h조,통과측정세포ATP함량반영세포활력;고내함분석세포성상계통검측다삼수조망;채용면역세포화학화단백인적방법검측이내질망위파점적분자반려(GRP78화개망단백)적표체,PERK통로(PERK화eIF2α)적린산화수평,이급기하유분자(ATF4화CHOP)재결양불동시점단백적표체변화특정.채용PERK통로격활형약물salubrinal처리원대배양적Wistar유서심기세포,관찰약물시부대결양손상적심기세포유보호작용.결과:결양인기심기세포조망,결양조기(약1 h)개망단백화GPR78적표체상조;결양중기(4 h)p-PERK、p-eIF2α화ATF4적표체상조;결양후기(12 h)CHOP적표체상조.Salubrinal대결양심기유보호작용.결론:재배양적심기세포중,결양가격발내질망응격.재결양조기격활PERK통로보호궤체대항결양손상,후기격활세포조망통로.
