国际生物制品学杂志
國際生物製品學雜誌
국제생물제품학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
1期
1-4
,共4页
HIV-1%HIV核心蛋白质p24%基因产物,gag%大肠杆菌
HIV-1%HIV覈心蛋白質p24%基因產物,gag%大腸桿菌
HIV-1%HIV핵심단백질p24%기인산물,gag%대장간균
目的 用基因工程方法获得HIVp24蛋白编码区基因片段,构建重组质粒,并在大肠杆菌中高效表达目的 蛋白.方法 设计带有酶切位点的引物,扩增p24基因,分别连接到pET-11c和pET-16b载体上,将两种表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达.选择离子交换层析和分子筛层析纯化p24.结果 p24在大肠杆菌中高效表达,p24在非还原性电泳中呈单一条带,提示有较好的立体结构,p24-pET-16b的表达量占到总蛋白表达量的30%.经纯化后蛋白纯度达到90%以上.结论 p24能在大肠杆菌中高效表达.
目的 用基因工程方法穫得HIVp24蛋白編碼區基因片段,構建重組質粒,併在大腸桿菌中高效錶達目的 蛋白.方法 設計帶有酶切位點的引物,擴增p24基因,分彆連接到pET-11c和pET-16b載體上,將兩種錶達載體轉化到大腸桿菌BL21(DE3)中,誘導錶達.選擇離子交換層析和分子篩層析純化p24.結果 p24在大腸桿菌中高效錶達,p24在非還原性電泳中呈單一條帶,提示有較好的立體結構,p24-pET-16b的錶達量佔到總蛋白錶達量的30%.經純化後蛋白純度達到90%以上.結論 p24能在大腸桿菌中高效錶達.
목적 용기인공정방법획득HIVp24단백편마구기인편단,구건중조질립,병재대장간균중고효표체목적 단백.방법 설계대유매절위점적인물,확증p24기인,분별련접도pET-11c화pET-16b재체상,장량충표체재체전화도대장간균BL21(DE3)중,유도표체.선택리자교환층석화분자사층석순화p24.결과 p24재대장간균중고효표체,p24재비환원성전영중정단일조대,제시유교호적입체결구,p24-pET-16b적표체량점도총단백표체량적30%.경순화후단백순도체도90%이상.결론 p24능재대장간균중고효표체.
