中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2012年
19期
4215-4218
,共4页
滕赞%王嫘%李智%岡部素典%吉田淑子%二階堂敏雄
滕讚%王嫘%李智%岡部素典%吉田淑子%二階堂敏雄
등찬%왕류%리지%강부소전%길전숙자%이계당민웅
小鼠%羊膜干细胞%胰蛋白酶%胶原酶%OCT3/4%SSEA-1
小鼠%羊膜榦細胞%胰蛋白酶%膠原酶%OCT3/4%SSEA-1
소서%양막간세포%이단백매%효원매%OCT3/4%SSEA-1
目的 探索小鼠羊膜细胞(mAMCs)分离、培养方法及其体外增殖分化的特性.方法 应用不同浓度胰蛋白酶及与胶原酶按不同的先后顺序作用小鼠羊膜,并采用不同的细胞接种浓度培养细胞,分别考核最佳的分离及体外培养方案.免疫荧光及免疫组化法鉴定mAMCs的干细胞标志.结果 胰蛋白酶消化及与胶原酶合用顺序不同,导致收获上皮细胞与间质细胞的数量和比例明显不同,先用胰蛋白酶消化将得到较多的上皮细胞,反之先用胶原酶消化将得到较多的间质细胞.以不同浓度接种上皮和间质细胞,原代培养2w后生长曲线可见原代培养的mAMCs在y轴为对数坐标时呈长尾s型曲线.原代培养的上皮和间质细胞有较长的停滞期(2～4 d),指数增长期的细胞倍增时间间质细胞相对上皮细胞短,因此融合期时间间质细胞明显较短.接种浓度对间质细胞的生长曲线影响不大,但对上皮细胞有较大影响.在Chang medium C营养液中原代附壁培养mAMCs OCT3/4及SSEA-1阳性.结论 应用0.25％胰蛋白酶及与0.075％胶原酶作用小鼠羊膜,可获得分离的mAMCs,原代培养mAMCs干细胞标志OCT3/4及SSEA-1阳性.
目的 探索小鼠羊膜細胞(mAMCs)分離、培養方法及其體外增殖分化的特性.方法 應用不同濃度胰蛋白酶及與膠原酶按不同的先後順序作用小鼠羊膜,併採用不同的細胞接種濃度培養細胞,分彆攷覈最佳的分離及體外培養方案.免疫熒光及免疫組化法鑒定mAMCs的榦細胞標誌.結果 胰蛋白酶消化及與膠原酶閤用順序不同,導緻收穫上皮細胞與間質細胞的數量和比例明顯不同,先用胰蛋白酶消化將得到較多的上皮細胞,反之先用膠原酶消化將得到較多的間質細胞.以不同濃度接種上皮和間質細胞,原代培養2w後生長麯線可見原代培養的mAMCs在y軸為對數坐標時呈長尾s型麯線.原代培養的上皮和間質細胞有較長的停滯期(2～4 d),指數增長期的細胞倍增時間間質細胞相對上皮細胞短,因此融閤期時間間質細胞明顯較短.接種濃度對間質細胞的生長麯線影響不大,但對上皮細胞有較大影響.在Chang medium C營養液中原代附壁培養mAMCs OCT3/4及SSEA-1暘性.結論 應用0.25％胰蛋白酶及與0.075％膠原酶作用小鼠羊膜,可穫得分離的mAMCs,原代培養mAMCs榦細胞標誌OCT3/4及SSEA-1暘性.
목적 탐색소서양막세포(mAMCs)분리、배양방법급기체외증식분화적특성.방법 응용불동농도이단백매급여효원매안불동적선후순서작용소서양막,병채용불동적세포접충농도배양세포,분별고핵최가적분리급체외배양방안.면역형광급면역조화법감정mAMCs적간세포표지.결과 이단백매소화급여효원매합용순서불동,도치수획상피세포여간질세포적수량화비례명현불동,선용이단백매소화장득도교다적상피세포,반지선용효원매소화장득도교다적간질세포.이불동농도접충상피화간질세포,원대배양2w후생장곡선가견원대배양적mAMCs재y축위대수좌표시정장미s형곡선.원대배양적상피화간질세포유교장적정체기(2～4 d),지수증장기적세포배증시간간질세포상대상피세포단,인차융합기시간간질세포명현교단.접충농도대간질세포적생장곡선영향불대,단대상피세포유교대영향.재Chang medium C영양액중원대부벽배양mAMCs OCT3/4급SSEA-1양성.결론 응용0.25％이단백매급여0.075％효원매작용소서양막,가획득분리적mAMCs,원대배양mAMCs간세포표지OCT3/4급SSEA-1양성.
