微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2003年
5期
43-48
,共6页
蔡启良%刘子铎%孙明%喻子牛
蔡啟良%劉子鐸%孫明%喻子牛
채계량%류자탁%손명%유자우
苏云金芽胞杆菌%营养期杀虫蛋白%杀虫晶体蛋白%协同作用
囌雲金芽胞桿菌%營養期殺蟲蛋白%殺蟲晶體蛋白%協同作用
소운금아포간균%영양기살충단백%살충정체단백%협동작용
将构建的营养期杀虫蛋白基因vip83表达质粒pBMB2328和含杀虫晶体蛋白基因(cry1Ac10或cry1Ca)质粒同时电转化无质粒突变株BMB171并双抗筛选.经PCR特异引物扩增验证,分别得到含cry1Ac10和vip83、cry1Ca和vip83的双基因重组菌BMB2830-171和BMB2882-171.用单基因重组菌作对照,分别测定了营养期杀虫蛋白Vip83与杀虫晶体蛋白Cry1Ac10和Cry1Ca两组蛋白对3种重要鳞翅目害虫毒力.经统计分析,结果表明两组杀虫蛋白Vip83与Cry1Ac10和Vip83与Cry1Ca之间对棉铃虫均存在拮抗作用,对甜菜夜蛾协同作用不明显;但对小菜蛾前者协同作用不明显,而后者则有增效作用,其共毒系数为32.6.双基因的遗传稳定性检测表明这种正负协同关系具有一定的分子遗传稳定性,可为高效广谱工程菌的构建提供依据.
將構建的營養期殺蟲蛋白基因vip83錶達質粒pBMB2328和含殺蟲晶體蛋白基因(cry1Ac10或cry1Ca)質粒同時電轉化無質粒突變株BMB171併雙抗篩選.經PCR特異引物擴增驗證,分彆得到含cry1Ac10和vip83、cry1Ca和vip83的雙基因重組菌BMB2830-171和BMB2882-171.用單基因重組菌作對照,分彆測定瞭營養期殺蟲蛋白Vip83與殺蟲晶體蛋白Cry1Ac10和Cry1Ca兩組蛋白對3種重要鱗翅目害蟲毒力.經統計分析,結果錶明兩組殺蟲蛋白Vip83與Cry1Ac10和Vip83與Cry1Ca之間對棉鈴蟲均存在拮抗作用,對甜菜夜蛾協同作用不明顯;但對小菜蛾前者協同作用不明顯,而後者則有增效作用,其共毒繫數為32.6.雙基因的遺傳穩定性檢測錶明這種正負協同關繫具有一定的分子遺傳穩定性,可為高效廣譜工程菌的構建提供依據.
장구건적영양기살충단백기인vip83표체질립pBMB2328화함살충정체단백기인(cry1Ac10혹cry1Ca)질립동시전전화무질립돌변주BMB171병쌍항사선.경PCR특이인물확증험증,분별득도함cry1Ac10화vip83、cry1Ca화vip83적쌍기인중조균BMB2830-171화BMB2882-171.용단기인중조균작대조,분별측정료영양기살충단백Vip83여살충정체단백Cry1Ac10화Cry1Ca량조단백대3충중요린시목해충독력.경통계분석,결과표명량조살충단백Vip83여Cry1Ac10화Vip83여Cry1Ca지간대면령충균존재길항작용,대첨채야아협동작용불명현;단대소채아전자협동작용불명현,이후자칙유증효작용,기공독계수위32.6.쌍기인적유전은정성검측표명저충정부협동관계구유일정적분자유전은정성,가위고효엄보공정균적구건제공의거.
