中国地方病防治杂志
中國地方病防治雜誌
중국지방병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF CONTROL OF ENDEMIC DISEASES
2006年
5期
265-267
,共3页
朱参胜%宋朝君%彭双清%李荣华%金伯泉
硃參勝%宋朝君%彭雙清%李榮華%金伯泉
주삼성%송조군%팽쌍청%리영화%금백천
T-2%毒素%单克隆抗体
T-2%毒素%單剋隆抗體
T-2%독소%단극륭항체
目的 制备和鉴定抗T-2毒素单克隆抗体.方法 将T-2毒素与牛血清白蛋白(BSA)交联,制备T-2毒素与BSA交联物(T-2-BSA),以T-2-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,以HAT培养液筛选杂交瘤细胞,用有限稀释法进行克隆化.用筛选的阳性单克隆细胞株,按常规方法制备腹水,腹水用饱和硫酸铵沉淀后,用阴离子交换法纯化,获得纯化的单克隆抗体.采用ELISA鉴定抗体的亚类,并测定血清和腹水中抗体的效价.结果 制备出T-2毒素与BSA交联物T-2-BSA,免疫小鼠血清的效价在1×10-6以上.获得1株能稳定分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞系,该抗体(T2mAb)属于IgG1亚类,轻链为κ链.腹水效价为1×10-6.ELISA法证明T2mAb可与T-2毒素发生特异性反应.结论 成功制备出抗T-2毒素单克隆抗体,为建立测定食品、饲料和组织液中T-2毒素的免疫学方法打下了坚实的基础.
目的 製備和鑒定抗T-2毒素單剋隆抗體.方法 將T-2毒素與牛血清白蛋白(BSA)交聯,製備T-2毒素與BSA交聯物(T-2-BSA),以T-2-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾髒細胞與小鼠骨髓瘤細胞Sp2/0融閤,以HAT培養液篩選雜交瘤細胞,用有限稀釋法進行剋隆化.用篩選的暘性單剋隆細胞株,按常規方法製備腹水,腹水用飽和硫痠銨沉澱後,用陰離子交換法純化,穫得純化的單剋隆抗體.採用ELISA鑒定抗體的亞類,併測定血清和腹水中抗體的效價.結果 製備齣T-2毒素與BSA交聯物T-2-BSA,免疫小鼠血清的效價在1×10-6以上.穫得1株能穩定分泌抗T-2毒素抗體的雜交瘤細胞繫,該抗體(T2mAb)屬于IgG1亞類,輕鏈為κ鏈.腹水效價為1×10-6.ELISA法證明T2mAb可與T-2毒素髮生特異性反應.結論 成功製備齣抗T-2毒素單剋隆抗體,為建立測定食品、飼料和組織液中T-2毒素的免疫學方法打下瞭堅實的基礎.
목적 제비화감정항T-2독소단극륭항체.방법 장T-2독소여우혈청백단백(BSA)교련,제비T-2독소여BSA교련물(T-2-BSA),이T-2-BSA면역BALB/c소서,취기비장세포여소서골수류세포Sp2/0융합,이HAT배양액사선잡교류세포,용유한희석법진행극륭화.용사선적양성단극륭세포주,안상규방법제비복수,복수용포화류산안침정후,용음리자교환법순화,획득순화적단극륭항체.채용ELISA감정항체적아류,병측정혈청화복수중항체적효개.결과 제비출T-2독소여BSA교련물T-2-BSA,면역소서혈청적효개재1×10-6이상.획득1주능은정분비항T-2독소항체적잡교류세포계,해항체(T2mAb)속우IgG1아류,경련위κ련.복수효개위1×10-6.ELISA법증명T2mAb가여T-2독소발생특이성반응.결론 성공제비출항T-2독소단극륭항체,위건립측정식품、사료화조직액중T-2독소적면역학방법타하료견실적기출.