单克隆抗体制备的亲和填料在血浆高丰度蛋白分离中的应用
단극륭항체제비적친화전료재혈장고봉도단백분리중적응용
A Study of Monoclonal Antibody Prepared Immunoaffinity Resin for Separating High Abundant Proteins in Human Plasma Samples
  • 万方数据
    中国生物工程杂志 중국생물공정잡지
    JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
    2008年 5期 71-77 ,共7页

    王云丹%宁云山%彭丹丹%李妍%方勤美%邓新宇%姜颖%李明

    왕운단%저운산%팽단단%리연%방근미%산신우%강영%리명

    单克隆抗体%定向固定%高丰度蛋白%血浆蛋白质组 單剋隆抗體%定嚮固定%高豐度蛋白%血漿蛋白質組
    단극륭항체%정향고정%고봉도단백%혈장단백질조
    分离去除高丰度蛋白成为血浆蛋白质组研究的关键问题之一.从已建株的17株抗人血浆白蛋白单克隆抗体库中选出一株合适抗体.该抗体用Protein G Sepharose 4B吸附,然后用交联剂DMP(庚二亚氨酸二甲酯二盐酸盐)使之与Protein G 蛋白共价交联.实验结果显示600μl(结合1mg抗体)胶能分离10μl血浆中的白蛋白和球蛋白.填料重复使用10次后吸附能力无显著改变.对填料的吸附蛋白进行MALDI-TOF/TOF 鉴定主要为白蛋白和球蛋白及其碎片,但发现吸附的蛋白有转铁蛋白,纤维蛋白原,抗胰蛋白酶,前脂蛋白,Vitamin D 结合蛋白,Keratin 10和 CD5 抗原相似蛋白.实验结果表明该方法能在固定目的抗体的同时最大量地保持抗体活性,该方法有望在蛋白质组学研究的高丰度蛋白分离中得到广泛应用.
    분리거제고봉도단백성위혈장단백질조연구적관건문제지일.종이건주적17주항인혈장백단백단극륭항체고중선출일주합괄항체.해항체용Protein G Sepharose 4B흡부,연후용교련제DMP(경이아안산이갑지이염산염)사지여Protein G 단백공개교련.실험결과현시600μl(결합1mg항체)효능분리10μl혈장중적백단백화구단백.전료중복사용10차후흡부능력무현저개변.대전료적흡부단백진행MALDI-TOF/TOF 감정주요위백단백화구단백급기쇄편,단발현흡부적단백유전철단백,섬유단백원,항이단백매,전지단백,Vitamin D 결합단백,Keratin 10화 CD5 항원상사단백.실험결과표명해방법능재고정목적항체적동시최대량지보지항체활성,해방법유망재단백질조학연구적고봉도단백분리중득도엄범응용.
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