华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2009年
1期
11-14
,共4页
杨硕%熊盛道%熊维宁%许淑云%兰芬%史雪梅%徐国鹏%陆小霞%胡琼洁
楊碩%熊盛道%熊維寧%許淑雲%蘭芬%史雪梅%徐國鵬%陸小霞%鬍瓊潔
양석%웅성도%웅유저%허숙운%란분%사설매%서국붕%륙소하%호경길
铜绿假单胞菌%密度感知%对氧磷酶%绿脓素
銅綠假單胞菌%密度感知%對氧燐酶%綠膿素
동록가단포균%밀도감지%대양린매%록농소
目的 研究对氧磷酶1(PON1)在铜绿假单胞菌绿脓素生成及绿脓素所致细胞损伤中的作用,探讨其在防治肺部铜绿假单胞菌感染方面的可能作用.方法 ①以293细胞为表达细胞,分为pcDNA 3.1(+)-PON1转染组、pcD-NA 3.1(+)-EGFP转染组及生理盐水组,转染细胞后,将细胞蛋白提取物或生理盐水混入铜绿假单胞菌培养物中,过夜培养后检测培养物中密度感知系统信号分子--酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactone,AHL)及绿脓素水平.②以A549细胞为效应细胞,分为转染组、未转染组及生理盐水组.转染组采用pcDNA 3.1(+)-PON1转染A549细胞后并经G418筛选的阳性克隆细胞,未转染组采用普通A549细胞,培养液中加入绿脓素(30 μg/ml),生理盐水组为培养液中加入生理盐水的普通A549细胞,观察细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性.结果 ①pcDNA 3.1(+)-PON1转染组铜绿假单胞菌培养物中AHL信号分子水平和绿脓素水平较生理盐水组和pcDNA 3.1(+)-EGFP转染组均明显降低;②绿脓素作用后,未转染组细胞内氧化应激水平较生理盐水组明显升高,而转染组较未转染组有所下降.结论 PON1不仅能够减少铜绿假单胞菌绿脓素的生成,而且可以减轻绿脓素所致的细胞氧化损伤,可能具有防治铜绿假单胞菌感染的潜在价值.
目的 研究對氧燐酶1(PON1)在銅綠假單胞菌綠膿素生成及綠膿素所緻細胞損傷中的作用,探討其在防治肺部銅綠假單胞菌感染方麵的可能作用.方法 ①以293細胞為錶達細胞,分為pcDNA 3.1(+)-PON1轉染組、pcD-NA 3.1(+)-EGFP轉染組及生理鹽水組,轉染細胞後,將細胞蛋白提取物或生理鹽水混入銅綠假單胞菌培養物中,過夜培養後檢測培養物中密度感知繫統信號分子--酰基高絲氨痠內酯(N-acylhomoserine lactone,AHL)及綠膿素水平.②以A549細胞為效應細胞,分為轉染組、未轉染組及生理鹽水組.轉染組採用pcDNA 3.1(+)-PON1轉染A549細胞後併經G418篩選的暘性剋隆細胞,未轉染組採用普通A549細胞,培養液中加入綠膿素(30 μg/ml),生理鹽水組為培養液中加入生理鹽水的普通A549細胞,觀察細胞內活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性.結果 ①pcDNA 3.1(+)-PON1轉染組銅綠假單胞菌培養物中AHL信號分子水平和綠膿素水平較生理鹽水組和pcDNA 3.1(+)-EGFP轉染組均明顯降低;②綠膿素作用後,未轉染組細胞內氧化應激水平較生理鹽水組明顯升高,而轉染組較未轉染組有所下降.結論 PON1不僅能夠減少銅綠假單胞菌綠膿素的生成,而且可以減輕綠膿素所緻的細胞氧化損傷,可能具有防治銅綠假單胞菌感染的潛在價值.
목적 연구대양린매1(PON1)재동록가단포균록농소생성급록농소소치세포손상중적작용,탐토기재방치폐부동록가단포균감염방면적가능작용.방법 ①이293세포위표체세포,분위pcDNA 3.1(+)-PON1전염조、pcD-NA 3.1(+)-EGFP전염조급생리염수조,전염세포후,장세포단백제취물혹생리염수혼입동록가단포균배양물중,과야배양후검측배양물중밀도감지계통신호분자--선기고사안산내지(N-acylhomoserine lactone,AHL)급록농소수평.②이A549세포위효응세포,분위전염조、미전염조급생리염수조.전염조채용pcDNA 3.1(+)-PON1전염A549세포후병경G418사선적양성극륭세포,미전염조채용보통A549세포,배양액중가입록농소(30 μg/ml),생리염수조위배양액중가입생리염수적보통A549세포,관찰세포내활성양(ROS)、병이철(MDA)수평급초양화물기화매(SOD)、과양화경매(CAT)활성.결과 ①pcDNA 3.1(+)-PON1전염조동록가단포균배양물중AHL신호분자수평화록농소수평교생리염수조화pcDNA 3.1(+)-EGFP전염조균명현강저;②록농소작용후,미전염조세포내양화응격수평교생리염수조명현승고,이전염조교미전염조유소하강.결론 PON1불부능구감소동록가단포균록농소적생성,이차가이감경록농소소치적세포양화손상,가능구유방치동록가단포균감염적잠재개치.
