医学检验与临床
醫學檢驗與臨床
의학검험여림상
MEDICAL LATORATORY SCIENCE AND CLINICES
2010年
6期
12-14
,共3页
真核表达载体%HBV%HBeAg%肝癌细胞
真覈錶達載體%HBV%HBeAg%肝癌細胞
진핵표체재체%HBV%HBeAg%간암세포
目的 构建含有HBV e抗原基因的pcDNA3真核表达载体,并在BEL7402肝癌细胞中表达与鉴定.方法 设计合成针对e基因片段的PCR引物序列,以pUC19/3HBV为模板扩增出HBeAg基因片段,克隆到真核表达载体pcDNA3的多克隆位点中,构建pcDNA-HBeAg真核表达载体.然后采用脂质体转染法将其转染人肝癌细胞系BEL7402肝癌细胞,分别运用逆转录PCR和ELISA在RNA水平和蛋白水平检测其在真核细胞中的表达.结果 所克隆HBV e抗原基因片段经测序完全正确;重组质粒转染BEL7402细胞后,检测有HBeAg表达.结论 成功构建pcDNA3-HBeAg真核表达载体,并在肝癌细胞中有效表达,为进一步体外研究HBeAg奠定基础.
目的 構建含有HBV e抗原基因的pcDNA3真覈錶達載體,併在BEL7402肝癌細胞中錶達與鑒定.方法 設計閤成針對e基因片段的PCR引物序列,以pUC19/3HBV為模闆擴增齣HBeAg基因片段,剋隆到真覈錶達載體pcDNA3的多剋隆位點中,構建pcDNA-HBeAg真覈錶達載體.然後採用脂質體轉染法將其轉染人肝癌細胞繫BEL7402肝癌細胞,分彆運用逆轉錄PCR和ELISA在RNA水平和蛋白水平檢測其在真覈細胞中的錶達.結果 所剋隆HBV e抗原基因片段經測序完全正確;重組質粒轉染BEL7402細胞後,檢測有HBeAg錶達.結論 成功構建pcDNA3-HBeAg真覈錶達載體,併在肝癌細胞中有效錶達,為進一步體外研究HBeAg奠定基礎.
목적 구건함유HBV e항원기인적pcDNA3진핵표체재체,병재BEL7402간암세포중표체여감정.방법 설계합성침대e기인편단적PCR인물서렬,이pUC19/3HBV위모판확증출HBeAg기인편단,극륭도진핵표체재체pcDNA3적다극륭위점중,구건pcDNA-HBeAg진핵표체재체.연후채용지질체전염법장기전염인간암세포계BEL7402간암세포,분별운용역전록PCR화ELISA재RNA수평화단백수평검측기재진핵세포중적표체.결과 소극륭HBV e항원기인편단경측서완전정학;중조질립전염BEL7402세포후,검측유HBeAg표체.결론 성공구건pcDNA3-HBeAg진핵표체재체,병재간암세포중유효표체,위진일보체외연구HBeAg전정기출.
