安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
3615-3617
,共3页
于永生%罗晓彤%朴庆林%金海国
于永生%囉曉彤%樸慶林%金海國
우영생%라효동%박경림%금해국
角蛋白关联蛋白6-1%毛囊特异表达载体%体外验证
角蛋白關聯蛋白6-1%毛囊特異錶達載體%體外驗證
각단백관련단백6-1%모낭특이표체재체%체외험증
[目的]构建毛囊特异性表达绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(KIF Ⅱ-9)cDNA的毛囊特异性表达载体,并证明其表达的有效性.[方法]根据绵羊毛角蛋白关联蛋白6.1(KAP6.1)基因已知DNA序列设计合成2个特异性引物,以绵羊基因组DNA为模板,通过PcR扩增得到KAP6-15'调控序列,然后与毛角蛋白Ⅱ型中间丝基因(KIF Ⅱ-9)CDNA、去除CMY启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,新生小鼠皮下注射该重组载体证明其表达有效性.[结果]PCR扩增出1 042 bp的特异性片段,DNA测序结果证明,该克隆片段与KAP6-1 5'端调控区序列相比具有极高的一致性;构建的毛囊特异性表达载体PCDNA3.1-KK,皮下注射新生小鼠,皮肤内KIF Ⅱ-9得到转录.[结论]该试验构建的载体PCDNA3.1-KK具有表达特异性.
[目的]構建毛囊特異性錶達綿羊毛角蛋白Ⅱ型中間絲9(KIF Ⅱ-9)cDNA的毛囊特異性錶達載體,併證明其錶達的有效性.[方法]根據綿羊毛角蛋白關聯蛋白6.1(KAP6.1)基因已知DNA序列設計閤成2箇特異性引物,以綿羊基因組DNA為模闆,通過PcR擴增得到KAP6-15'調控序列,然後與毛角蛋白Ⅱ型中間絲基因(KIF Ⅱ-9)CDNA、去除CMY啟動子的錶達載體pcDNA3.1連接構成皮膚特異性錶達載體pcDNA3.1-KK,新生小鼠皮下註射該重組載體證明其錶達有效性.[結果]PCR擴增齣1 042 bp的特異性片段,DNA測序結果證明,該剋隆片段與KAP6-1 5'耑調控區序列相比具有極高的一緻性;構建的毛囊特異性錶達載體PCDNA3.1-KK,皮下註射新生小鼠,皮膚內KIF Ⅱ-9得到轉錄.[結論]該試驗構建的載體PCDNA3.1-KK具有錶達特異性.
[목적]구건모낭특이성표체면양모각단백Ⅱ형중간사9(KIF Ⅱ-9)cDNA적모낭특이성표체재체,병증명기표체적유효성.[방법]근거면양모각단백관련단백6.1(KAP6.1)기인이지DNA서렬설계합성2개특이성인물,이면양기인조DNA위모판,통과PcR확증득도KAP6-15'조공서렬,연후여모각단백Ⅱ형중간사기인(KIF Ⅱ-9)CDNA、거제CMY계동자적표체재체pcDNA3.1련접구성피부특이성표체재체pcDNA3.1-KK,신생소서피하주사해중조재체증명기표체유효성.[결과]PCR확증출1 042 bp적특이성편단,DNA측서결과증명,해극륭편단여KAP6-1 5'단조공구서렬상비구유겁고적일치성;구건적모낭특이성표체재체PCDNA3.1-KK,피하주사신생소서,피부내KIF Ⅱ-9득도전록.[결론]해시험구건적재체PCDNA3.1-KK구유표체특이성.
