化学与生物工程
化學與生物工程
화학여생물공정
CHEMISTRY & BIOENGINEERING
2011年
7期
39-43
,共5页
3-甾酮-△1-脱氢酶%分枝杆菌%染色体走读
3-甾酮-△1-脫氫酶%分枝桿菌%染色體走讀
3-치동-△1-탈경매%분지간균%염색체주독
通过分析已知两种分枝杆菌的3-甾酮-△1-脱氢酶(kstD)碱基保守序列,设计简并引物,以甾醇降解菌株Mycobacterium neoaurum NwIB-01的DNA作模板,得到一个kstD基因片段,通过染色体走读,得到其完整的阅读框.以pUC18为异源表达载体,构建pTQ002表达质粒,在E.coli DH5α中对kstD进行了胞内活性表达,测定Mycobacterium neoaurum NwIB-01 kstD酶活为(0.37±0.05)U·mL-1,约为原酶活的一半,为构建高效转化生成3-酮基-1,4-二烯类固醇的基因工程菌奠定了基础.
通過分析已知兩種分枝桿菌的3-甾酮-△1-脫氫酶(kstD)堿基保守序列,設計簡併引物,以甾醇降解菌株Mycobacterium neoaurum NwIB-01的DNA作模闆,得到一箇kstD基因片段,通過染色體走讀,得到其完整的閱讀框.以pUC18為異源錶達載體,構建pTQ002錶達質粒,在E.coli DH5α中對kstD進行瞭胞內活性錶達,測定Mycobacterium neoaurum NwIB-01 kstD酶活為(0.37±0.05)U·mL-1,約為原酶活的一半,為構建高效轉化生成3-酮基-1,4-二烯類固醇的基因工程菌奠定瞭基礎.
통과분석이지량충분지간균적3-치동-△1-탈경매(kstD)감기보수서렬,설계간병인물,이치순강해균주Mycobacterium neoaurum NwIB-01적DNA작모판,득도일개kstD기인편단,통과염색체주독,득도기완정적열독광.이pUC18위이원표체재체,구건pTQ002표체질립,재E.coli DH5α중대kstD진행료포내활성표체,측정Mycobacterium neoaurum NwIB-01 kstD매활위(0.37±0.05)U·mL-1,약위원매활적일반,위구건고효전화생성3-동기-1,4-이희류고순적기인공정균전정료기출.
