CAJ | 학술논문

从发病鸡场中收集的腺胃肿大病料(编号为2/97、3/97和1/98),经匀浆和无菌处理后在SPF鸡胚中传代、分离和鉴定.结果显示,接种病料培养的鸡胚可干扰新城疫病毒的复制;这些分离毒株可与阳性标准参考株IBV抗血清反应,但表现出较低的中和反应能力.在理化和血凝特性等鉴定的基础上,参照已发表的IBV Beaudette毒株S1基因序列,设计并合成1对含有EcoR I和BamH I 酶切位点的特异性引物,利用RT-PCR技术扩增到分离毒株3/97、2/97、1/98 长度为1.93 kb 的cDNA片段,并将其cDNA片段插入到克隆载体pBlueScript-SK(+)中,进行核苷酸序列的测定,确证所扩增和克隆的cDNA 片段由1 930个碱基组成,并编码1条由620个氨基酸组成的多肽.与GenBank中其它IBV S1 基因序列进行比较,发现3/97、2/97和1/98毒株与所比较的IBV毒株核苷酸的一致性为73.6%～99.7%,氨基酸的一致性为78.4%～99.7%.
종발병계장중수집적선위종대병료(편호위2/97、3/97화1/98),경균장화무균처리후재SPF계배중전대、분리화감정.결과현시,접충병료배양적계배가간우신성역병독적복제;저사분리독주가여양성표준삼고주IBV항혈청반응,단표현출교저적중화반응능력.재이화화혈응특성등감정적기출상,삼조이발표적IBV Beaudette독주S1기인서렬,설계병합성1대함유EcoR I화BamH I 매절위점적특이성인물,이용RT-PCR기술확증도분리독주3/97、2/97、1/98 장도위1.93 kb 적cDNA편단,병장기cDNA편단삽입도극륭재체pBlueScript-SK(+)중,진행핵감산서렬적측정,학증소확증화극륭적cDNA 편단유1 930개감기조성,병편마1조유620개안기산조성적다태.여GenBank중기타IBV S1 기인서렬진행비교,발현3/97、2/97화1/98독주여소비교적IBV독주핵감산적일치성위73.6%～99.7%,안기산적일치성위78.4%～99.7%.