中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2005年
8期
82-86
,共5页
李壮林%常国栋%陈倩洁%姚雪静
李壯林%常國棟%陳倩潔%姚雪靜
리장림%상국동%진천길%요설정
PEX%补料分批培养%包涵体
PEX%補料分批培養%包涵體
PEX%보료분비배양%포함체
将人的PEX基因克隆到表达载体pET-15b上,构建重组工程菌BL21(DE3)/pETPEX.采用5L发酵罐补料分批培养,当菌体密度增长到OD600为35时,用IPTG诱导,PEX蛋白形成包涵体,最终OD600达到90,PEX的表达水平达2.2 g/L.包涵体蛋白经过纯化、复性后,获得生物活性.PEX能够有效抑制HUVECs的增殖,加药96h后,20nmol/L PEX对HUVECs生长有77.9%的抑制率;PEX能阻断bFGF诱导的鸡胚尿囊膜血管生成,抑制率为85%;小鼠实验表明,当给药剂量为5mg/kg时,PEX对S180肉瘤有31.4%的抑瘤率(P<0.05).PEX是一个有效的抑制新血管生成和肿瘤生长的蛋白质因子.
將人的PEX基因剋隆到錶達載體pET-15b上,構建重組工程菌BL21(DE3)/pETPEX.採用5L髮酵罐補料分批培養,噹菌體密度增長到OD600為35時,用IPTG誘導,PEX蛋白形成包涵體,最終OD600達到90,PEX的錶達水平達2.2 g/L.包涵體蛋白經過純化、複性後,穫得生物活性.PEX能夠有效抑製HUVECs的增殖,加藥96h後,20nmol/L PEX對HUVECs生長有77.9%的抑製率;PEX能阻斷bFGF誘導的鷄胚尿囊膜血管生成,抑製率為85%;小鼠實驗錶明,噹給藥劑量為5mg/kg時,PEX對S180肉瘤有31.4%的抑瘤率(P<0.05).PEX是一箇有效的抑製新血管生成和腫瘤生長的蛋白質因子.
장인적PEX기인극륭도표체재체pET-15b상,구건중조공정균BL21(DE3)/pETPEX.채용5L발효관보료분비배양,당균체밀도증장도OD600위35시,용IPTG유도,PEX단백형성포함체,최종OD600체도90,PEX적표체수평체2.2 g/L.포함체단백경과순화、복성후,획득생물활성.PEX능구유효억제HUVECs적증식,가약96h후,20nmol/L PEX대HUVECs생장유77.9%적억제솔;PEX능조단bFGF유도적계배뇨낭막혈관생성,억제솔위85%;소서실험표명,당급약제량위5mg/kg시,PEX대S180육류유31.4%적억류솔(P<0.05).PEX시일개유효적억제신혈관생성화종류생장적단백질인자.