口腔医学
口腔醫學
구강의학
STOMATOLOGY
2008年
7期
340-342,346
,共4页
牙龈卟啉单胞菌%rgpA%rgpB%牙龈素
牙齦卟啉單胞菌%rgpA%rgpB%牙齦素
아간계람단포균%rgpA%rgpB%아간소
目的 克隆牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)rgpA、rgpB 蛋白酶区,构建 rgpA、rgpB 蛋白酶区原核表达系统.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)从Pg ATCC 33277 菌株中扩增 rgpA、rgpB 蛋白酶区,T-A 克隆后测定核苷酸序列,构建 pET42a 的 rgpA/rgpB蛋白酶区表达载体,在 E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导其表达.结果 所克隆的Pg ATCC 33277 菌株 rgpA、rgpB 基因蛋白酶区的核苷酸序列与报道的相应核苷酸序列同源性分别为98.9%、99.0%,氨基酸序列同源性分别高达99.2%、99.1%.pET42a-rgpA/rgpB-E.coli BL21DE3系统的蛋白表达量为细菌总蛋白的60%左右.结论 本研究成功地构建Pg rgpA、rgpB 蛋白酶区高效表达系统,为测定 RgpA、RgpB 免疫原性及作用提供前提.
目的 剋隆牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)rgpA、rgpB 蛋白酶區,構建 rgpA、rgpB 蛋白酶區原覈錶達繫統.方法 採用聚閤酶鏈式反應(PCR)從Pg ATCC 33277 菌株中擴增 rgpA、rgpB 蛋白酶區,T-A 剋隆後測定覈苷痠序列,構建 pET42a 的 rgpA/rgpB蛋白酶區錶達載體,在 E.coli BL21DE3宿主菌中用不同濃度的IPTG誘導其錶達.結果 所剋隆的Pg ATCC 33277 菌株 rgpA、rgpB 基因蛋白酶區的覈苷痠序列與報道的相應覈苷痠序列同源性分彆為98.9%、99.0%,氨基痠序列同源性分彆高達99.2%、99.1%.pET42a-rgpA/rgpB-E.coli BL21DE3繫統的蛋白錶達量為細菌總蛋白的60%左右.結論 本研究成功地構建Pg rgpA、rgpB 蛋白酶區高效錶達繫統,為測定 RgpA、RgpB 免疫原性及作用提供前提.
목적 극륭아간계람단포균(Porphyromonas gingivalis, Pg)rgpA、rgpB 단백매구,구건 rgpA、rgpB 단백매구원핵표체계통.방법 채용취합매련식반응(PCR)종Pg ATCC 33277 균주중확증 rgpA、rgpB 단백매구,T-A 극륭후측정핵감산서렬,구건 pET42a 적 rgpA/rgpB단백매구표체재체,재 E.coli BL21DE3숙주균중용불동농도적IPTG유도기표체.결과 소극륭적Pg ATCC 33277 균주 rgpA、rgpB 기인단백매구적핵감산서렬여보도적상응핵감산서렬동원성분별위98.9%、99.0%,안기산서렬동원성분별고체99.2%、99.1%.pET42a-rgpA/rgpB-E.coli BL21DE3계통적단백표체량위세균총단백적60%좌우.결론 본연구성공지구건Pg rgpA、rgpB 단백매구고효표체계통,위측정 RgpA、RgpB 면역원성급작용제공전제.
