中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2011年
1期
14-16
,共3页
周晓晶%万敏%卫红飞%王丽颖%吴秀丽
週曉晶%萬敏%衛紅飛%王麗穎%吳秀麗
주효정%만민%위홍비%왕려영%오수려
HBsAg%小鼠肝癌细胞%转染
HBsAg%小鼠肝癌細胞%轉染
HBsAg%소서간암세포%전염
目的 构建乙肝表面抗原(HBsAg)基因(678bp)的真核表达质粒(pcDNA3 -HBsAg),转染小鼠乳肝癌细胞(H22),获得其稳定表达细胞株(H22/HBsAg).方法 用PCR方法从含乙肝病毒(HBV)基因的PUC18-HBV质粒上扩增HBsAg基因序列;经酶切、连接构建pcDNA3-HBsAg;利用改良的阳离子脂质体介导法将其转染入H22细胞,经G418筛选获得阳性克隆细胞株,用RT-PCR法检测阳性细胞株的HBsAg mRNA.结果成功构建了重组HBsAg真核表达载体,并获得了稳定表达HBsAg的细胞株,为进一步的实验研究奠定了基础.
目的 構建乙肝錶麵抗原(HBsAg)基因(678bp)的真覈錶達質粒(pcDNA3 -HBsAg),轉染小鼠乳肝癌細胞(H22),穫得其穩定錶達細胞株(H22/HBsAg).方法 用PCR方法從含乙肝病毒(HBV)基因的PUC18-HBV質粒上擴增HBsAg基因序列;經酶切、連接構建pcDNA3-HBsAg;利用改良的暘離子脂質體介導法將其轉染入H22細胞,經G418篩選穫得暘性剋隆細胞株,用RT-PCR法檢測暘性細胞株的HBsAg mRNA.結果成功構建瞭重組HBsAg真覈錶達載體,併穫得瞭穩定錶達HBsAg的細胞株,為進一步的實驗研究奠定瞭基礎.
목적 구건을간표면항원(HBsAg)기인(678bp)적진핵표체질립(pcDNA3 -HBsAg),전염소서유간암세포(H22),획득기은정표체세포주(H22/HBsAg).방법 용PCR방법종함을간병독(HBV)기인적PUC18-HBV질립상확증HBsAg기인서렬;경매절、련접구건pcDNA3-HBsAg;이용개량적양리자지질체개도법장기전염입H22세포,경G418사선획득양성극륭세포주,용RT-PCR법검측양성세포주적HBsAg mRNA.결과성공구건료중조HBsAg진핵표체재체,병획득료은정표체HBsAg적세포주,위진일보적실험연구전정료기출.
