中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
12期
945-948
,共4页
杜景娇%薛强%邹明强%滕文锋%郭浩%但晓雅
杜景嬌%薛彊%鄒明彊%滕文鋒%郭浩%但曉雅
두경교%설강%추명강%등문봉%곽호%단효아
新城疫病毒%环介导逆转录等温扩增技术%融合基因(F基因)
新城疫病毒%環介導逆轉錄等溫擴增技術%融閤基因(F基因)
신성역병독%배개도역전록등온확증기술%융합기인(F기인)
为建立一种新城疫病毒(NDV)的简便、快速、高灵敏度的检测方法,本研究根据NDV融合蛋白基因(F基因)设计合成6条特异性引物,在恒温水浴中进行核酸扩增反应,对反应温度、反应时间以及反应液中Mg2+浓度进行优化,获得最佳反应条件,结果经凝胶电泳分析并在可见光下直接观察.整个RT-LAMP检测用时0.5 h,检测敏感度比RT-PCR高100倍,对禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒无交叉反应.本研究建立的NDV RT-LAMP检测方法速度快、不需要高精密的仪器,而且具有灵敏度高、特异性强,操作简单等特点,有望在核酸扩增检测方法中取代RT-PCR技术.
為建立一種新城疫病毒(NDV)的簡便、快速、高靈敏度的檢測方法,本研究根據NDV融閤蛋白基因(F基因)設計閤成6條特異性引物,在恆溫水浴中進行覈痠擴增反應,對反應溫度、反應時間以及反應液中Mg2+濃度進行優化,穫得最佳反應條件,結果經凝膠電泳分析併在可見光下直接觀察.整箇RT-LAMP檢測用時0.5 h,檢測敏感度比RT-PCR高100倍,對禽流感病毒、鷄傳染性支氣管炎病毒和鷄傳染性喉氣管炎病毒無交扠反應.本研究建立的NDV RT-LAMP檢測方法速度快、不需要高精密的儀器,而且具有靈敏度高、特異性彊,操作簡單等特點,有望在覈痠擴增檢測方法中取代RT-PCR技術.
위건립일충신성역병독(NDV)적간편、쾌속、고령민도적검측방법,본연구근거NDV융합단백기인(F기인)설계합성6조특이성인물,재항온수욕중진행핵산확증반응,대반응온도、반응시간이급반응액중Mg2+농도진행우화,획득최가반응조건,결과경응효전영분석병재가견광하직접관찰.정개RT-LAMP검측용시0.5 h,검측민감도비RT-PCR고100배,대금류감병독、계전염성지기관염병독화계전염성후기관염병독무교차반응.본연구건립적NDV RT-LAMP검측방법속도쾌、불수요고정밀적의기,이차구유령민도고、특이성강,조작간단등특점,유망재핵산확증검측방법중취대RT-PCR기술.
