上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
4期
458-462,472
,共6页
束金莲%潘瑜%刘晓莉%高丰厚%金惠敏
束金蓮%潘瑜%劉曉莉%高豐厚%金惠敏
속금련%반유%류효리%고봉후%금혜민
3T3-L1脂肪细胞%胰岛素抵抗%促红细胞生成素受体%人类促红细胞生成素
3T3-L1脂肪細胞%胰島素牴抗%促紅細胞生成素受體%人類促紅細胞生成素
3T3-L1지방세포%이도소저항%촉홍세포생성소수체%인류촉홍세포생성소
目的 探讨重组人促红细胞生成素( rHuEPO)对正常和胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞促红细胞生成素受体(EPOR)表达及其下游信号通路的调控作用.方法 以1μmoL/L地塞米松诱导建立3T3-L1脂肪细胞胰岛索抵抗模型(模型组),以分化成熟的正常3T3-L1脂肪细胞作为对照组.采用细胞免疫荧光法和Western blotting法检测细胞EPOR的蛋白表达,采用Real-TimePCR技术检测细胞EPOR mRNA的表达.分别以rHuEPO、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂(LY294002)及信号转导和转录激活因子5( STAT5)抑制剂对模型组和对照组细胞进行干预,采用Western blotting法检测不同药物干预对EPOR蛋白的表达及其下游分子丝(苏)氨酸蛋白激酶( Akt)和STAT5磷酸化水平(p-Akt和p-STAT5蛋白的表达)的影响.结果 与对照组比较,模型组EPOR蛋白和mRNA的表达均显著下调(P＜0.05).干预实验结果显示:与相应对照组或模型组比较,rHuEPO+对照组或模型组EPOR、p-Akt和p-STAT5蛋白的相对表达量均显著上调(P＜0.05)；与相应rHuEPO+对照组或模型组比较,rHuEPO+LY29400或STAT5阻断剂+对照组或模型组的p-Akt和p-STAT5蛋白的相对表达量显著下调(P＜0.05).结论 正常3T3 -L1脂肪细胞上存在EPOR,胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞EPOR蛋白和mRNA的表达下调,rHuEPO可通过EPOR介导激活PDK-Akt和JAK2 -STAT5信号通路.
目的 探討重組人促紅細胞生成素( rHuEPO)對正常和胰島素牴抗3T3-L1脂肪細胞促紅細胞生成素受體(EPOR)錶達及其下遊信號通路的調控作用.方法 以1μmoL/L地塞米鬆誘導建立3T3-L1脂肪細胞胰島索牴抗模型(模型組),以分化成熟的正常3T3-L1脂肪細胞作為對照組.採用細胞免疫熒光法和Western blotting法檢測細胞EPOR的蛋白錶達,採用Real-TimePCR技術檢測細胞EPOR mRNA的錶達.分彆以rHuEPO、燐脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑製劑(LY294002)及信號轉導和轉錄激活因子5( STAT5)抑製劑對模型組和對照組細胞進行榦預,採用Western blotting法檢測不同藥物榦預對EPOR蛋白的錶達及其下遊分子絲(囌)氨痠蛋白激酶( Akt)和STAT5燐痠化水平(p-Akt和p-STAT5蛋白的錶達)的影響.結果 與對照組比較,模型組EPOR蛋白和mRNA的錶達均顯著下調(P＜0.05).榦預實驗結果顯示:與相應對照組或模型組比較,rHuEPO+對照組或模型組EPOR、p-Akt和p-STAT5蛋白的相對錶達量均顯著上調(P＜0.05)；與相應rHuEPO+對照組或模型組比較,rHuEPO+LY29400或STAT5阻斷劑+對照組或模型組的p-Akt和p-STAT5蛋白的相對錶達量顯著下調(P＜0.05).結論 正常3T3 -L1脂肪細胞上存在EPOR,胰島素牴抗3T3-L1脂肪細胞EPOR蛋白和mRNA的錶達下調,rHuEPO可通過EPOR介導激活PDK-Akt和JAK2 -STAT5信號通路.
목적 탐토중조인촉홍세포생성소( rHuEPO)대정상화이도소저항3T3-L1지방세포촉홍세포생성소수체(EPOR)표체급기하유신호통로적조공작용.방법 이1μmoL/L지새미송유도건립3T3-L1지방세포이도색저항모형(모형조),이분화성숙적정상3T3-L1지방세포작위대조조.채용세포면역형광법화Western blotting법검측세포EPOR적단백표체,채용Real-TimePCR기술검측세포EPOR mRNA적표체.분별이rHuEPO、린지선기순3격매(PI3K)억제제(LY294002)급신호전도화전록격활인자5( STAT5)억제제대모형조화대조조세포진행간예,채용Western blotting법검측불동약물간예대EPOR단백적표체급기하유분자사(소)안산단백격매( Akt)화STAT5린산화수평(p-Akt화p-STAT5단백적표체)적영향.결과 여대조조비교,모형조EPOR단백화mRNA적표체균현저하조(P＜0.05).간예실험결과현시:여상응대조조혹모형조비교,rHuEPO+대조조혹모형조EPOR、p-Akt화p-STAT5단백적상대표체량균현저상조(P＜0.05)；여상응rHuEPO+대조조혹모형조비교,rHuEPO+LY29400혹STAT5조단제+대조조혹모형조적p-Akt화p-STAT5단백적상대표체량현저하조(P＜0.05).결론 정상3T3 -L1지방세포상존재EPOR,이도소저항3T3-L1지방세포EPOR단백화mRNA적표체하조,rHuEPO가통과EPOR개도격활PDK-Akt화JAK2 -STAT5신호통로.
