南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
4期
59-64
,共6页
王晨%张演义%房经贵%宋长年%刘洪%王西成
王晨%張縯義%房經貴%宋長年%劉洪%王西成
왕신%장연의%방경귀%송장년%류홍%왕서성
葡萄%microRNAs%靶基因%冬芽%实时荧光定量RT-PCR%RLM-5'-RACE
葡萄%microRNAs%靶基因%鼕芽%實時熒光定量RT-PCR%RLM-5'-RACE
포도%microRNAs%파기인%동아%실시형광정량RT-PCR%RLM-5'-RACE
利用半定量RT-PCR与实时荧光定量RT-PCR( qRT-PCR)技术检测‘藤稔’葡萄microRNA156b(Vv-miR156b)和microRNA172c(Vv-miR172c)及其靶基因(Vv-SPL9和Vv-AP2)在摘心处理(5月14日、5月20日、5月28日)后不同发育时期冬芽中的表达情况,并利用RLM-5'-RACE验证了miRNAs作用其靶基因的方式.结果表明:仅5月28日摘心处理的冬芽能够进行花芽分化并形成花序,而其他处理及对照未能花芽分化2种RT-PCR检测结果基本一致,5月28日摘心处理的2条miRNAs表达水平明显下降,且花序中有最低表达相应的靶基因在冬芽二次成花过程中的表达水平呈现出与其miRNAs相反的变化趋势.RLM-5’-RACE结果显示,2条miRNAs介导靶基因裂解,裂解位点均在miRNAs5’端的笫10和11位碱基之间.表明microRNA156b和microRNA172e通过介导相应靶基因的裂解调控其靶基因的表达,从而影响葡萄冬芽的二次成花.
利用半定量RT-PCR與實時熒光定量RT-PCR( qRT-PCR)技術檢測‘籐稔’葡萄microRNA156b(Vv-miR156b)和microRNA172c(Vv-miR172c)及其靶基因(Vv-SPL9和Vv-AP2)在摘心處理(5月14日、5月20日、5月28日)後不同髮育時期鼕芽中的錶達情況,併利用RLM-5'-RACE驗證瞭miRNAs作用其靶基因的方式.結果錶明:僅5月28日摘心處理的鼕芽能夠進行花芽分化併形成花序,而其他處理及對照未能花芽分化2種RT-PCR檢測結果基本一緻,5月28日摘心處理的2條miRNAs錶達水平明顯下降,且花序中有最低錶達相應的靶基因在鼕芽二次成花過程中的錶達水平呈現齣與其miRNAs相反的變化趨勢.RLM-5’-RACE結果顯示,2條miRNAs介導靶基因裂解,裂解位點均在miRNAs5’耑的笫10和11位堿基之間.錶明microRNA156b和microRNA172e通過介導相應靶基因的裂解調控其靶基因的錶達,從而影響葡萄鼕芽的二次成花.
이용반정량RT-PCR여실시형광정량RT-PCR( qRT-PCR)기술검측‘등임’포도microRNA156b(Vv-miR156b)화microRNA172c(Vv-miR172c)급기파기인(Vv-SPL9화Vv-AP2)재적심처리(5월14일、5월20일、5월28일)후불동발육시기동아중적표체정황,병이용RLM-5'-RACE험증료miRNAs작용기파기인적방식.결과표명:부5월28일적심처리적동아능구진행화아분화병형성화서,이기타처리급대조미능화아분화2충RT-PCR검측결과기본일치,5월28일적심처리적2조miRNAs표체수평명현하강,차화서중유최저표체상응적파기인재동아이차성화과정중적표체수평정현출여기miRNAs상반적변화추세.RLM-5’-RACE결과현시,2조miRNAs개도파기인렬해,렬해위점균재miRNAs5’단적자10화11위감기지간.표명microRNA156b화microRNA172e통과개도상응파기인적렬해조공기파기인적표체,종이영향포도동아적이차성화.
