禽白血病病毒群特异性抗原单克隆抗体的制备与鉴定
금백혈병병독군특이성항원단극륭항체적제비여감정
Preparation and identification of monoclonal antibodies against the group specific antigen of avian leukosis virus
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2012年 10期 782-785 ,共4页

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    禽白血病病毒%p27蛋白%原核表达%单克隆抗体 禽白血病病毒%p27蛋白%原覈錶達%單剋隆抗體
    금백혈병병독%p27단백%원핵표체%단극륭항체
    为制备禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原的单克隆抗体(MAb),本研究从ALV-J病毒株感染DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出ALV群特异性抗原p27基因,并将其克隆至pMD 18-T载体中,酶切鉴定后进行序列测定和分析.最后将p27基因亚克隆至载体pET-30a(+)中,转化受体菌BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测获得融合蛋白.经过western blot检测,表达的蛋白具有良好的反应原性.将纯化的p27蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得5株能稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株.5株MAb与纯化的p27蛋白以及不同亚群ALV可以发生特异性反应.所制备的MAb为禽白血病的诊断方法研究奠定了基础.
    위제비금백혈병병독(ALV)군특이성항원적단극륭항체(MAb),본연구종ALV-J병독주감염DF-1세포적동융렬해액중제취DNA,통과PCR방법확증출ALV군특이성항원p27기인,병장기극륭지pMD 18-T재체중,매절감정후진행서렬측정화분석.최후장p27기인아극륭지재체pET-30a(+)중,전화수체균BL21,IPTG유도표체,경SDS-PAGE검측획득융합단백.경과western blot검측,표체적단백구유량호적반응원성.장순화적p27단백작위항원,면역7주령BALB/c소서,이용림파세포잡교류기술,획득5주능은정분비특이성MAb적잡교류세포주.5주MAb여순화적p27단백이급불동아군ALV가이발생특이성반응.소제비적MAb위금백혈병적진단방법연구전정료기출.
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