大连医科大学学报
大連醫科大學學報
대련의과대학학보
JOURNAL OF DALIAN MEDICAL UNIVERSITY
2003年
2期
81-84
,共4页
巩鹏%王忠裕%王洪江%谭广%由翠珍%李克军
鞏鵬%王忠裕%王洪江%譚廣%由翠珍%李剋軍
공붕%왕충유%왕홍강%담엄%유취진%리극군
超氧化物歧化酶%逆转录病毒%基因
超氧化物歧化酶%逆轉錄病毒%基因
초양화물기화매%역전록병독%기인
[目的]克隆超氧化物歧化酶(SOD)基因,构建逆转录病毒(pLNCX)-SOD真核表达载体转染复合体,为基因转染及基因治疗进行准备.[方法]RT-PCR法扩增SOD基因,pLNCX载体进行限制性酶切、去磷酸化,电泳后回收切开的pLNCX及SOD片段,经连接反应后构建pLNCX-SOD真核表达载体.[结果]大鼠心肌细胞提取的总RNA电泳结果,28 s和18 s两种核糖体RNA的位置和亮度说明提取的RNA是完整的.SOD cDNA测序结果表明,克隆的SOD cDNA序列与大鼠SOD序列一致.质粒的所有克隆均具有同样大小,与计算结果一致,为7.0kb.限制性酶切电泳结果显示,pLNCX-SOD经HindⅢ酶切后,得到了约500bp的SOD片段,说明质粒的构建是正确的.[结论]克隆了大鼠SOD基因,构建了pLNCX-Cu/Zn SOD真核表达载体复合体.
[目的]剋隆超氧化物歧化酶(SOD)基因,構建逆轉錄病毒(pLNCX)-SOD真覈錶達載體轉染複閤體,為基因轉染及基因治療進行準備.[方法]RT-PCR法擴增SOD基因,pLNCX載體進行限製性酶切、去燐痠化,電泳後迴收切開的pLNCX及SOD片段,經連接反應後構建pLNCX-SOD真覈錶達載體.[結果]大鼠心肌細胞提取的總RNA電泳結果,28 s和18 s兩種覈糖體RNA的位置和亮度說明提取的RNA是完整的.SOD cDNA測序結果錶明,剋隆的SOD cDNA序列與大鼠SOD序列一緻.質粒的所有剋隆均具有同樣大小,與計算結果一緻,為7.0kb.限製性酶切電泳結果顯示,pLNCX-SOD經HindⅢ酶切後,得到瞭約500bp的SOD片段,說明質粒的構建是正確的.[結論]剋隆瞭大鼠SOD基因,構建瞭pLNCX-Cu/Zn SOD真覈錶達載體複閤體.
[목적]극륭초양화물기화매(SOD)기인,구건역전록병독(pLNCX)-SOD진핵표체재체전염복합체,위기인전염급기인치료진행준비.[방법]RT-PCR법확증SOD기인,pLNCX재체진행한제성매절、거린산화,전영후회수절개적pLNCX급SOD편단,경련접반응후구건pLNCX-SOD진핵표체재체.[결과]대서심기세포제취적총RNA전영결과,28 s화18 s량충핵당체RNA적위치화량도설명제취적RNA시완정적.SOD cDNA측서결과표명,극륭적SOD cDNA서렬여대서SOD서렬일치.질립적소유극륭균구유동양대소,여계산결과일치,위7.0kb.한제성매절전영결과현시,pLNCX-SOD경HindⅢ매절후,득도료약500bp적SOD편단,설명질립적구건시정학적.[결론]극륭료대서SOD기인,구건료pLNCX-Cu/Zn SOD진핵표체재체복합체.