世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2004年
12期
2898-2901
,共4页
薛国柱%窦科峰%赵爱志%药立波
薛國柱%竇科峰%趙愛誌%藥立波
설국주%두과봉%조애지%약립파
目的:对全人源肝癌噬菌体单链抗体库进行鉴定,筛选肝癌抗体,同时对抗体的活性进行鉴定.方法:PCR鉴定阳性重组菌TG1中人肝癌ScFv的插入率.先以人成纤维细胞黏附后再以肝癌细胞SMMC-7721为抗原对所建抗体库进行3轮"黏附-洗脱-扩增"的亲和筛选.将筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定;通过ELISA法鉴定其与人肝癌细胞的结合活性.结果:ScFv基因插入率为70%.在亲和筛选过程中,肝癌噬菌体单链抗体得到富集,收获率逐轮得到提高,第3轮为第1轮的214倍.筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定后,均可检测到目的基因.得到3株特异性肝癌单链抗体.结论:利用噬菌体抗体库技术结合减数筛选得到了肝癌噬菌体单链抗体及其基因,且筛选后的抗体片段与人肝癌细胞有特异性的结合活性.
目的:對全人源肝癌噬菌體單鏈抗體庫進行鑒定,篩選肝癌抗體,同時對抗體的活性進行鑒定.方法:PCR鑒定暘性重組菌TG1中人肝癌ScFv的插入率.先以人成纖維細胞黏附後再以肝癌細胞SMMC-7721為抗原對所建抗體庫進行3輪"黏附-洗脫-擴增"的親和篩選.將篩選後的ScFv進行PCR鑒定及雙酶切鑒定;通過ELISA法鑒定其與人肝癌細胞的結閤活性.結果:ScFv基因插入率為70%.在親和篩選過程中,肝癌噬菌體單鏈抗體得到富集,收穫率逐輪得到提高,第3輪為第1輪的214倍.篩選後的ScFv進行PCR鑒定及雙酶切鑒定後,均可檢測到目的基因.得到3株特異性肝癌單鏈抗體.結論:利用噬菌體抗體庫技術結閤減數篩選得到瞭肝癌噬菌體單鏈抗體及其基因,且篩選後的抗體片段與人肝癌細胞有特異性的結閤活性.
목적:대전인원간암서균체단련항체고진행감정,사선간암항체,동시대항체적활성진행감정.방법:PCR감정양성중조균TG1중인간암ScFv적삽입솔.선이인성섬유세포점부후재이간암세포SMMC-7721위항원대소건항체고진행3륜"점부-세탈-확증"적친화사선.장사선후적ScFv진행PCR감정급쌍매절감정;통과ELISA법감정기여인간암세포적결합활성.결과:ScFv기인삽입솔위70%.재친화사선과정중,간암서균체단련항체득도부집,수획솔축륜득도제고,제3륜위제1륜적214배.사선후적ScFv진행PCR감정급쌍매절감정후,균가검측도목적기인.득도3주특이성간암단련항체.결론:이용서균체항체고기술결합감수사선득도료간암서균체단련항체급기기인,차사선후적항체편단여인간암세포유특이성적결합활성.