生物医学工程学杂志
生物醫學工程學雜誌
생물의학공정학잡지
2005年
3期
588-592
,共5页
曾令宇%黄强%陈利弘%万琳%卢晓风
曾令宇%黃彊%陳利弘%萬琳%盧曉風
증령우%황강%진리홍%만림%로효풍
单链抗体%包含体%复性
單鏈抗體%包含體%複性
단련항체%포함체%복성
探索表达于大肠杆菌中的人源性抗CTLA4单链抗体(Anti-CTLA4-scFv)的体外复性方法.采用稀释和透析两种复性方式,并分析影响复性得率的各种因素如复性时间、温度、适宜的氧化-还原体系对其的影响.通过非还原电泳确定复性效果,并测定蛋白含量.结果显示:含0.15 mol·L-1NaCl、1 μmol·L-1氧化型谷胱甘肽和3μmol·L-1还原型谷胱甘肽的50 mmol·L-1Tris-HCl(pH 8.0)缓冲液作为Anti-CTLA4-scFv的复性液,4℃下透析复性48～54 h,可获得具有天然构象的蛋白质.该方法复性蛋白得率高,从3.9 g菌体中可复性获得28 mg蛋白.
探索錶達于大腸桿菌中的人源性抗CTLA4單鏈抗體(Anti-CTLA4-scFv)的體外複性方法.採用稀釋和透析兩種複性方式,併分析影響複性得率的各種因素如複性時間、溫度、適宜的氧化-還原體繫對其的影響.通過非還原電泳確定複性效果,併測定蛋白含量.結果顯示:含0.15 mol·L-1NaCl、1 μmol·L-1氧化型穀胱甘肽和3μmol·L-1還原型穀胱甘肽的50 mmol·L-1Tris-HCl(pH 8.0)緩遲液作為Anti-CTLA4-scFv的複性液,4℃下透析複性48～54 h,可穫得具有天然構象的蛋白質.該方法複性蛋白得率高,從3.9 g菌體中可複性穫得28 mg蛋白.
탐색표체우대장간균중적인원성항CTLA4단련항체(Anti-CTLA4-scFv)적체외복성방법.채용희석화투석량충복성방식,병분석영향복성득솔적각충인소여복성시간、온도、괄의적양화-환원체계대기적영향.통과비환원전영학정복성효과,병측정단백함량.결과현시:함0.15 mol·L-1NaCl、1 μmol·L-1양화형곡광감태화3μmol·L-1환원형곡광감태적50 mmol·L-1Tris-HCl(pH 8.0)완충액작위Anti-CTLA4-scFv적복성액,4℃하투석복성48～54 h,가획득구유천연구상적단백질.해방법복성단백득솔고,종3.9 g균체중가복성획득28 mg단백.
