人间隙连接蛋白31相互作用蛋白Annexin Ⅱ的筛选与证实
인간극련접단백31상호작용단백Annexin Ⅱ적사선여증실
Human Gap Junction Protein Connexin31 Interacts Directly With Annexin Ⅱ
  • 万方数据
    生物化学与生物物理进展 생물화학여생물물리진전
    PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
    2005年 6期 501-507 ,共7页

    刘宇%贺力强%谭志平%唐程远%迟静薇%蔡芳%潘乾%龙志高%梁德生%邬玲仟%戴和平%夏昆%张灼华%夏家辉

    류우%하력강%담지평%당정원%지정미%채방%반건%룡지고%량덕생%오령천%대화평%하곤%장작화%하가휘

    间隙连接蛋白31%抗体蛋白质相互作用%annexinⅡ%免疫共沉淀%免疫共定位 間隙連接蛋白31%抗體蛋白質相互作用%annexinⅡ%免疫共沉澱%免疫共定位
    간극련접단백31%항체단백질상호작용%annexinⅡ%면역공침정%면역공정위
    间隙连接蛋白31(connexin31,Cx31)是间隙连接蛋白(connexin)家族的一员,目前对于Cx31的功能及其调节方式知之甚少.采用固相多肽合成的方法合成Cx31羧基端一个多肽片段(250～266),经HPLC纯化后偶联到匙孔蜮血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、并纯化、经蛋白质印迹、细胞免疫荧光染色、免疫沉淀证实得到的抗体为特异性抗Cx31的抗体.运用制备的抗Cx31多克隆抗体免疫沉淀,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解,Q-TOF质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,运用抗体pull-down实验,筛选到可能相互作用蛋白annexinⅡ,经过免疫共沉淀、细胞免疫共定位等实验证实annexinⅡ与Cx31相互作用.
    간극련접단백31(connexin31,Cx31)시간극련접단백(connexin)가족적일원,목전대우Cx31적공능급기조절방식지지심소.채용고상다태합성적방법합성Cx31최기단일개다태편단(250～266),경HPLC순화후우련도시공역혈람단백,면역신서란웅토후채혈검측、병순화、경단백질인적、세포면역형광염색、면역침정증실득도적항체위특이성항Cx31적항체.운용제비적항Cx31다극륭항체면역침정,SDS-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)분리,단백질조대회수,단백질효괴매해,Q-TOF질보분석,수거고소묘사선가능상호작용단백,운용항체pull-down실험,사선도가능상호작용단백annexinⅡ,경과면역공침정、세포면역공정위등실험증실annexinⅡ여Cx31상호작용.
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