华北国防医药
華北國防醫藥
화북국방의약
MEDICAL JOURNAL OF NATIONAL DEFENDING FORCES IN NORTH CHINA
2006年
2期
77-79，封二
,共4页
杨永昌%王北宁%赖春宁%黎燕
楊永昌%王北寧%賴春寧%黎燕
양영창%왕북저%뢰춘저%려연
血小板%抗体,单克隆%质粒%大肠杆菌%基因表达
血小闆%抗體,單剋隆%質粒%大腸桿菌%基因錶達
혈소판%항체,단극륭%질립%대장간균%기인표체
目的:在原核细胞中表达抗血小板Fab抗体,为研制治疗性抗血小板抗体奠定基础.方法:从含有抗血小板抗体轻链基因和重链Fd段基因的克隆载体pGEM T-Easy上经双酶切获得抗体轻链基因和重链Fd段基因片段,将其以特定位点分别插入噬菌体抗体表达载体p3MH上,构建原核表达重组质粒p3MH/P140κ-Fd.转化E. coli XLI-Blu感受态细胞,并进行诱导表达,用ELISA方法进行鉴定.结果:血小板抗体轻链基因和重链Fd段基因片段准确插入p3MH载体,重组质粒在大肠杆菌表达的上清中含有与血小板特异性结合的Fab抗体.结论:在原核细胞中成功克隆并高效表达了可溶性的抗血小板Fab抗体.
目的:在原覈細胞中錶達抗血小闆Fab抗體,為研製治療性抗血小闆抗體奠定基礎.方法:從含有抗血小闆抗體輕鏈基因和重鏈Fd段基因的剋隆載體pGEM T-Easy上經雙酶切穫得抗體輕鏈基因和重鏈Fd段基因片段,將其以特定位點分彆插入噬菌體抗體錶達載體p3MH上,構建原覈錶達重組質粒p3MH/P140κ-Fd.轉化E. coli XLI-Blu感受態細胞,併進行誘導錶達,用ELISA方法進行鑒定.結果:血小闆抗體輕鏈基因和重鏈Fd段基因片段準確插入p3MH載體,重組質粒在大腸桿菌錶達的上清中含有與血小闆特異性結閤的Fab抗體.結論:在原覈細胞中成功剋隆併高效錶達瞭可溶性的抗血小闆Fab抗體.
목적:재원핵세포중표체항혈소판Fab항체,위연제치료성항혈소판항체전정기출.방법:종함유항혈소판항체경련기인화중련Fd단기인적극륭재체pGEM T-Easy상경쌍매절획득항체경련기인화중련Fd단기인편단,장기이특정위점분별삽입서균체항체표체재체p3MH상,구건원핵표체중조질립p3MH/P140κ-Fd.전화E. coli XLI-Blu감수태세포,병진행유도표체,용ELISA방법진행감정.결과:혈소판항체경련기인화중련Fd단기인편단준학삽입p3MH재체,중조질립재대장간균표체적상청중함유여혈소판특이성결합적Fab항체.결론:재원핵세포중성공극륭병고효표체료가용성적항혈소판Fab항체.
