麦类作物学报
麥類作物學報
맥류작물학보
JOURNAL OF TRITICEAE CROPS
2009年
5期
741-746
,共6页
李艳%许为钢%胡琳%张磊%齐学礼%张庆琛%王根松
李豔%許為鋼%鬍琳%張磊%齊學禮%張慶琛%王根鬆
리염%허위강%호림%장뢰%제학례%장경침%왕근송
小麦%玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)%高效表达载体%转基因%拷贝数
小麥%玉米燐痠烯醇式丙酮痠羧化酶(PEPC)%高效錶達載體%轉基因%拷貝數
소맥%옥미린산희순식병동산최화매(PEPC)%고효표체재체%전기인%고패수
为获得具有C4光合特征的高光效转基因小麦材料,利用从玉米中克隆的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因(pepc,GenBank接受号为FJ415327)构建高效双元表达载体,通过基因枪介导法将其导入小麦品种(系)中,利用Real-time PCR方法分析外源基因在转基因植株中的拷贝数.PCR和双酶切鉴定表明,玉米PEPC cDNA序列已插入双元表达载体pCAMBIA3301中,命名为p3301-pepc;对获得的抗性再生植株进行PCR扩增,其中有342株扩增出目的条带;在选取的15株转基因植株中7株拷贝数为1,3株拷贝数为2,2株拷贝数为3,拷贝数为5、8和17的分别为1株.初步证明玉米pepc基因已整合到小麦基因组中,且外源基因在转基因植株中既有单拷贝插入,也有多拷贝插入,这为进一步研究该基因在小麦基因组中的功能表达提供了试验材料.
為穫得具有C4光閤特徵的高光效轉基因小麥材料,利用從玉米中剋隆的燐痠烯醇式丙酮痠羧化酶(PEPC)基因(pepc,GenBank接受號為FJ415327)構建高效雙元錶達載體,通過基因鎗介導法將其導入小麥品種(繫)中,利用Real-time PCR方法分析外源基因在轉基因植株中的拷貝數.PCR和雙酶切鑒定錶明,玉米PEPC cDNA序列已插入雙元錶達載體pCAMBIA3301中,命名為p3301-pepc;對穫得的抗性再生植株進行PCR擴增,其中有342株擴增齣目的條帶;在選取的15株轉基因植株中7株拷貝數為1,3株拷貝數為2,2株拷貝數為3,拷貝數為5、8和17的分彆為1株.初步證明玉米pepc基因已整閤到小麥基因組中,且外源基因在轉基因植株中既有單拷貝插入,也有多拷貝插入,這為進一步研究該基因在小麥基因組中的功能錶達提供瞭試驗材料.
위획득구유C4광합특정적고광효전기인소맥재료,이용종옥미중극륭적린산희순식병동산최화매(PEPC)기인(pepc,GenBank접수호위FJ415327)구건고효쌍원표체재체,통과기인창개도법장기도입소맥품충(계)중,이용Real-time PCR방법분석외원기인재전기인식주중적고패수.PCR화쌍매절감정표명,옥미PEPC cDNA서렬이삽입쌍원표체재체pCAMBIA3301중,명명위p3301-pepc;대획득적항성재생식주진행PCR확증,기중유342주확증출목적조대;재선취적15주전기인식주중7주고패수위1,3주고패수위2,2주고패수위3,고패수위5、8화17적분별위1주.초보증명옥미pepc기인이정합도소맥기인조중,차외원기인재전기인식주중기유단고패삽입,야유다고패삽입,저위진일보연구해기인재소맥기인조중적공능표체제공료시험재료.
