青岛大学医学院学报
青島大學醫學院學報
청도대학의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE QINGDAO UNIVERSITATIS
2010年
4期
295-297,300
,共4页
许秀娥%徐宏伟%葛银林%张金玉%冯翠萍
許秀娥%徐宏偉%葛銀林%張金玉%馮翠萍
허수아%서굉위%갈은림%장금옥%풍취평
RNA干扰%MCF-7细胞%血管内皮生长因子受体2%甲基化%细胞凋亡
RNA榦擾%MCF-7細胞%血管內皮生長因子受體2%甲基化%細胞凋亡
RNA간우%MCF-7세포%혈관내피생장인자수체2%갑기화%세포조망
目的 探讨体外水平利用化学修饰的小干扰RNA(siRNA)敲减含激酶插入区受体(KDR)基因治疗乳癌的可行性和特异性.方法 采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000TM作为转染试剂,将针对人KDR基因的siRNA转染人乳癌细胞株MCF-7敲减KDR基因的表达.通过Hoechst 33258染色观察MCF-7细胞的凋亡情况;采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测NES1基因和RUNX3基因甲基化状态和mRNA的转录水平.结果 靶向KDR的siRNA转染MCF-7细胞后可诱导细胞凋亡,NES1基因和RUNX3基因甲基化程度降低,出现非甲基化条带,同时mRNA表达上调.结论 KDR siRNA在体外能逆转MCF-7细胞的NES1基因和RUNX3基因甲基化,并诱导细胞凋亡.
目的 探討體外水平利用化學脩飾的小榦擾RNA(siRNA)敲減含激酶插入區受體(KDR)基因治療乳癌的可行性和特異性.方法 採用暘離子脂質體Lipofectamine 2000TM作為轉染試劑,將針對人KDR基因的siRNA轉染人乳癌細胞株MCF-7敲減KDR基因的錶達.通過Hoechst 33258染色觀察MCF-7細胞的凋亡情況;採用甲基化特異性聚閤酶鏈反應(MSP)和逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測NES1基因和RUNX3基因甲基化狀態和mRNA的轉錄水平.結果 靶嚮KDR的siRNA轉染MCF-7細胞後可誘導細胞凋亡,NES1基因和RUNX3基因甲基化程度降低,齣現非甲基化條帶,同時mRNA錶達上調.結論 KDR siRNA在體外能逆轉MCF-7細胞的NES1基因和RUNX3基因甲基化,併誘導細胞凋亡.
목적 탐토체외수평이용화학수식적소간우RNA(siRNA)고감함격매삽입구수체(KDR)기인치료유암적가행성화특이성.방법 채용양리자지질체Lipofectamine 2000TM작위전염시제,장침대인KDR기인적siRNA전염인유암세포주MCF-7고감KDR기인적표체.통과Hoechst 33258염색관찰MCF-7세포적조망정황;채용갑기화특이성취합매련반응(MSP)화역전록취합매련반응(RT-PCR)방법검측NES1기인화RUNX3기인갑기화상태화mRNA적전록수평.결과 파향KDR적siRNA전염MCF-7세포후가유도세포조망,NES1기인화RUNX3기인갑기화정도강저,출현비갑기화조대,동시mRNA표체상조.결론 KDR siRNA재체외능역전MCF-7세포적NES1기인화RUNX3기인갑기화,병유도세포조망.
