生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
9期
134-137
,共4页
于光%段金廒%宋秉生%何子清
于光%段金廒%宋秉生%何子清
우광%단금오%송병생%하자청
当归%早薹%cDNA-AFLP%反应体系%表达差异
噹歸%早薹%cDNA-AFLP%反應體繫%錶達差異
당귀%조대%cDNA-AFLP%반응체계%표체차이
建立了利用cDNA-AFLP技术对当归早薹相关的差异表达基因进行筛选的方法,优化了影响cDNA-AFLP试验结果的关键因子,包括选择性扩增模板量、酶离子浓度、dNTP浓度.结果表明,以1 μL稀释10倍的预扩增产物作为模板、1.5 mmol/LMgCl2、0.6 mmol/L dNTP,进行的选择性扩增反应获得DNA片段分子量范围较广,在100-1 000 bp长度范围中均有扩增片段,是较为理想的选择性扩增的结果.聚丙烯酰胺凝胶电泳验证了试验结果,在优化条件下利用部分引物组合可以较好地比较早薹当归在基因转录水平发生的差异.
建立瞭利用cDNA-AFLP技術對噹歸早薹相關的差異錶達基因進行篩選的方法,優化瞭影響cDNA-AFLP試驗結果的關鍵因子,包括選擇性擴增模闆量、酶離子濃度、dNTP濃度.結果錶明,以1 μL稀釋10倍的預擴增產物作為模闆、1.5 mmol/LMgCl2、0.6 mmol/L dNTP,進行的選擇性擴增反應穫得DNA片段分子量範圍較廣,在100-1 000 bp長度範圍中均有擴增片段,是較為理想的選擇性擴增的結果.聚丙烯酰胺凝膠電泳驗證瞭試驗結果,在優化條件下利用部分引物組閤可以較好地比較早薹噹歸在基因轉錄水平髮生的差異.
건립료이용cDNA-AFLP기술대당귀조대상관적차이표체기인진행사선적방법,우화료영향cDNA-AFLP시험결과적관건인자,포괄선택성확증모판량、매리자농도、dNTP농도.결과표명,이1 μL희석10배적예확증산물작위모판、1.5 mmol/LMgCl2、0.6 mmol/L dNTP,진행적선택성확증반응획득DNA편단분자량범위교엄,재100-1 000 bp장도범위중균유확증편단,시교위이상적선택성확증적결과.취병희선알응효전영험증료시험결과,재우화조건하이용부분인물조합가이교호지비교조대당귀재기인전록수평발생적차이.