解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2012年
4期
473-478
,共6页
李建平%蔡世忠%刘俊%周玥%刘典锋%王亚平%顾恒伟
李建平%蔡世忠%劉俊%週玥%劉典鋒%王亞平%顧恆偉
리건평%채세충%류준%주모%류전봉%왕아평%고항위
人参皂苷Rg1%白血病%K562细胞株%复制性衰老%衰老相关β-半乳糖苷酶染色%四甲基偶氮唑盐法
人參皂苷Rg1%白血病%K562細胞株%複製性衰老%衰老相關β-半乳糖苷酶染色%四甲基偶氮唑鹽法
인삼조감Rg1%백혈병%K562세포주%복제성쇠로%쇠로상관β-반유당감매염색%사갑기우담서염법
目的 探讨人参皂苷Rg1(Rg1)诱导人白血病K562细胞复制性衰老特征性变化.方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)法筛选Rg1对K562细胞增殖抑制的最佳浓度及时间,以此浓度和作用时间诱导K562细胞衰老.流式细胞术检测Rg1对细胞增殖周期的影响;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测阳性细胞百分率;Southern blotting检测端粒长度;Western blotting检测复制性衰老信号通路相关P21、P53与Rb蛋白表达;透射电镜观察人白血病K562细胞衰老超微形态学改变.结果 Rg1在体外能明显抑制K562细胞增殖,其最佳作用浓度为20 μmol/L,时间为48h;诱导后的K562细胞阻滞于G2/M期;SA-β-Gal染色阳性细胞百分率增加(P<0.05);复制性衰老通路相关蛋白P21、P53和Rb表达上调(P<0.05);端粒长度缩短加速(P<0.05);经诱导细胞呈现胞体增大,溶酶体体积增大、数目增多,线粒体体积增大等衰老形态学变化.结论 Rg1可能经由p53-p21-Rb信号通路诱导K562细胞呈现复制性衰老特征.
目的 探討人參皂苷Rg1(Rg1)誘導人白血病K562細胞複製性衰老特徵性變化.方法 四甲基偶氮唑鹽(MTT)法篩選Rg1對K562細胞增殖抑製的最佳濃度及時間,以此濃度和作用時間誘導K562細胞衰老.流式細胞術檢測Rg1對細胞增殖週期的影響;衰老相關β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色檢測暘性細胞百分率;Southern blotting檢測耑粒長度;Western blotting檢測複製性衰老信號通路相關P21、P53與Rb蛋白錶達;透射電鏡觀察人白血病K562細胞衰老超微形態學改變.結果 Rg1在體外能明顯抑製K562細胞增殖,其最佳作用濃度為20 μmol/L,時間為48h;誘導後的K562細胞阻滯于G2/M期;SA-β-Gal染色暘性細胞百分率增加(P<0.05);複製性衰老通路相關蛋白P21、P53和Rb錶達上調(P<0.05);耑粒長度縮短加速(P<0.05);經誘導細胞呈現胞體增大,溶酶體體積增大、數目增多,線粒體體積增大等衰老形態學變化.結論 Rg1可能經由p53-p21-Rb信號通路誘導K562細胞呈現複製性衰老特徵.
목적 탐토인삼조감Rg1(Rg1)유도인백혈병K562세포복제성쇠로특정성변화.방법 사갑기우담서염(MTT)법사선Rg1대K562세포증식억제적최가농도급시간,이차농도화작용시간유도K562세포쇠로.류식세포술검측Rg1대세포증식주기적영향;쇠로상관β-반유당감매(SA-β-Gal)염색검측양성세포백분솔;Southern blotting검측단립장도;Western blotting검측복제성쇠로신호통로상관P21、P53여Rb단백표체;투사전경관찰인백혈병K562세포쇠로초미형태학개변.결과 Rg1재체외능명현억제K562세포증식,기최가작용농도위20 μmol/L,시간위48h;유도후적K562세포조체우G2/M기;SA-β-Gal염색양성세포백분솔증가(P<0.05);복제성쇠로통로상관단백P21、P53화Rb표체상조(P<0.05);단립장도축단가속(P<0.05);경유도세포정현포체증대,용매체체적증대、수목증다,선립체체적증대등쇠로형태학변화.결론 Rg1가능경유p53-p21-Rb신호통로유도K562세포정현복제성쇠로특정.
