河北大学学报（自然科学版）
河北大學學報（自然科學版）
하북대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HEBEI UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2012年
4期
387-392
,共6页
张艳芬%时海浪%王培莹%乔晓强%刘中成
張豔芬%時海浪%王培瑩%喬曉彊%劉中成
장염분%시해랑%왕배형%교효강%류중성
大鼠%Fcε3-4基因%克隆%表达%免疫特异性
大鼠%Fcε3-4基因%剋隆%錶達%免疫特異性
대서%Fcε3-4기인%극륭%표체%면역특이성
为了获得重组Fcε3-4蛋白,从变态反应性哮喘大鼠脾组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法克隆大鼠Fcε3-4基因,构建成原核表达载体pET17b-Fcε3-4,并转化大肠杆菌进行诱导表达,Fcε3-4蛋白主要以包涵体形式存在.经Ni-NAT亲和层析柱对尿素溶解的Fcε3-4蛋白进行了纯化,并利用降低尿素梯度的方法柱上对纯化蛋白进行了复性.经Western Blotting和ELISA鉴定,Fcε3-4蛋白具有Fcε的免疫特异性,能被抗大鼠Fcε抗体特异性识别,为下一步研究该蛋白奠定了基础.
為瞭穫得重組Fcε3-4蛋白,從變態反應性哮喘大鼠脾組織中提取總RNA,通過RT-PCR方法剋隆大鼠Fcε3-4基因,構建成原覈錶達載體pET17b-Fcε3-4,併轉化大腸桿菌進行誘導錶達,Fcε3-4蛋白主要以包涵體形式存在.經Ni-NAT親和層析柱對尿素溶解的Fcε3-4蛋白進行瞭純化,併利用降低尿素梯度的方法柱上對純化蛋白進行瞭複性.經Western Blotting和ELISA鑒定,Fcε3-4蛋白具有Fcε的免疫特異性,能被抗大鼠Fcε抗體特異性識彆,為下一步研究該蛋白奠定瞭基礎.
위료획득중조Fcε3-4단백,종변태반응성효천대서비조직중제취총RNA,통과RT-PCR방법극륭대서Fcε3-4기인,구건성원핵표체재체pET17b-Fcε3-4,병전화대장간균진행유도표체,Fcε3-4단백주요이포함체형식존재.경Ni-NAT친화층석주대뇨소용해적Fcε3-4단백진행료순화,병이용강저뇨소제도적방법주상대순화단백진행료복성.경Western Blotting화ELISA감정,Fcε3-4단백구유Fcε적면역특이성,능피항대서Fcε항체특이성식별,위하일보연구해단백전정료기출.
