CAJ | 학술논문

目的:建立α-干扰素(IFN-α)信号传导蛋白和基因检测的方法.方法:收集慢性乙型病毒性肝炎、自愈性乙型肝炎病毒感染者、健康对照者的外周静脉血并分离外周血单核细胞(PBMC),建立EB病毒(EBV)转化的B淋巴细胞系.体外分别用不同浓度的IFN-α(0、100、1000、10 000 IU/ml)刺激细胞,用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测IFN活化的干扰素刺激基因因子3(ISGF-3)和γ-干扰素活化因子(GAF);设计特异的引物和探针,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测IFN诱导抗病毒蛋白MxA、OAS1、PKR的相对表达.结果:成功建立了EBV转化的B淋巴细胞系.建立了EMSA检测ISGF-3和GAF转录蛋白的方法,用实时荧光定量PCR能够准确地检测样本中MxA、OAS1和PKR的表达.结论:建立了IFN信号传导蛋白和基因检测的方法,为进一步研究IFN治疗慢性乙型病毒性肝炎的疗效提供依据.
목적:건립α-간우소(IFN-α)신호전도단백화기인검측적방법.방법:수집만성을형병독성간염、자유성을형간염병독감염자、건강대조자적외주정맥혈병분리외주혈단핵세포(PBMC),건립EB병독(EBV)전화적B림파세포계.체외분별용불동농도적IFN-α(0、100、1000、10 000 IU/ml)자격세포,용응효전영천이솔시험(EMSA)검측IFN활화적간우소자격기인인자3(ISGF-3)화γ-간우소활화인자(GAF);설계특이적인물화탐침,용실시형광정량취합매련반응(PCR)검측IFN유도항병독단백MxA、OAS1、PKR적상대표체.결과:성공건립료EBV전화적B림파세포계.건립료EMSA검측ISGF-3화GAF전록단백적방법,용실시형광정량PCR능구준학지검측양본중MxA、OAS1화PKR적표체.결론:건립료IFN신호전도단백화기인검측적방법,위진일보연구IFN치료만성을형병독성간염적료효제공의거.