广西农业生物科学
廣西農業生物科學
엄서농업생물과학
JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE
2005年
4期
299-303
,共5页
大肠杆菌%假定的氧化还原酶%yqhD基因%克隆与表达
大腸桿菌%假定的氧化還原酶%yqhD基因%剋隆與錶達
대장간균%가정적양화환원매%yqhD기인%극륭여표체
以大肠杆菌Escherichia coli K-12基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到假定的氧化还原酶(putative oxidoreductase)基因yqhD,将它连接到克隆质粒pGEM-3zf(+)上,得到重组质粒pGEM-yqhD,对此重组质粒进行序列测定,对其DNA序列分析表明,yqhD基因全长为1 164 bp.再将yqhD基因插入表达载体pSE380,构建成重组子pSE380-yqhD,并在E.coli BL21中获得表达.研究表明,以1,3-丙二醇为底物时,基因工程菌在30°C下,以1.0 mmol/L IPTG诱导12 h的酶活力达到3.13 U/mL,比对照菌株提高4.4倍.
以大腸桿菌Escherichia coli K-12基因組DNA為模闆,利用PCR技術擴增得到假定的氧化還原酶(putative oxidoreductase)基因yqhD,將它連接到剋隆質粒pGEM-3zf(+)上,得到重組質粒pGEM-yqhD,對此重組質粒進行序列測定,對其DNA序列分析錶明,yqhD基因全長為1 164 bp.再將yqhD基因插入錶達載體pSE380,構建成重組子pSE380-yqhD,併在E.coli BL21中穫得錶達.研究錶明,以1,3-丙二醇為底物時,基因工程菌在30°C下,以1.0 mmol/L IPTG誘導12 h的酶活力達到3.13 U/mL,比對照菌株提高4.4倍.
이대장간균Escherichia coli K-12기인조DNA위모판,이용PCR기술확증득도가정적양화환원매(putative oxidoreductase)기인yqhD,장타련접도극륭질립pGEM-3zf(+)상,득도중조질립pGEM-yqhD,대차중조질립진행서렬측정,대기DNA서렬분석표명,yqhD기인전장위1 164 bp.재장yqhD기인삽입표체재체pSE380,구건성중조자pSE380-yqhD,병재E.coli BL21중획득표체.연구표명,이1,3-병이순위저물시,기인공정균재30°C하,이1.0 mmol/L IPTG유도12 h적매활력체도3.13 U/mL,비대조균주제고4.4배.
