检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2008年
6期
578-581
,共4页
谷胱甘肽-硫-转移酶%单克隆抗体%日本血吸虫%免疫学诊断
穀胱甘肽-硫-轉移酶%單剋隆抗體%日本血吸蟲%免疫學診斷
곡광감태-류-전이매%단극륭항체%일본혈흡충%면역학진단
目的 研究重组抗原26 ku日本血吸虫谷胱甘肽-硫-转移酶(SjGST)及其单克隆抗体在血吸虫患者分子诊断中的应用.方法 用已纯化的重组SjGST抗原免疫近交系(BALB/c)小鼠,数周后取免疫鼠脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,选择性培养基筛选出杂交瘤细胞,经有限稀释法克隆化,扩大培养制备针对重组SjGST抗原的单克隆抗体细胞株.亲和层析法纯化单克隆抗体.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测急性血吸虫病患者和非流行区正常人血清.结果 成功获得重组蛋白26 ku SjGST,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示与预期相对分子质量大小相符的蛋白条带.成功获得能够长期分泌抗重组SjGST单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA与蛋白质印迹试验均显示杂交瘤细胞培养上清中含有重组SjGST抗体.EIASA检测患者血清结果 表明,26 ku SjGST用于急性血吸虫病患者血清中抗体检测的阳性率为90.6%,26 ku SjGST抗体用于急性血吸虫病患者血清中循环抗原检测的阳性率为59.4%.结论 该重组蛋白用于急性血吸虫病患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,26 ku SjGST抗体对循环抗原的检测可作为抗体检测的有效补充.
目的 研究重組抗原26 ku日本血吸蟲穀胱甘肽-硫-轉移酶(SjGST)及其單剋隆抗體在血吸蟲患者分子診斷中的應用.方法 用已純化的重組SjGST抗原免疫近交繫(BALB/c)小鼠,數週後取免疫鼠脾細胞,與SP2/0骨髓瘤細胞進行細胞融閤,選擇性培養基篩選齣雜交瘤細胞,經有限稀釋法剋隆化,擴大培養製備針對重組SjGST抗原的單剋隆抗體細胞株.親和層析法純化單剋隆抗體.酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測急性血吸蟲病患者和非流行區正常人血清.結果 成功穫得重組蛋白26 ku SjGST,十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳顯示與預期相對分子質量大小相符的蛋白條帶.成功穫得能夠長期分泌抗重組SjGST單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,ELISA與蛋白質印跡試驗均顯示雜交瘤細胞培養上清中含有重組SjGST抗體.EIASA檢測患者血清結果 錶明,26 ku SjGST用于急性血吸蟲病患者血清中抗體檢測的暘性率為90.6%,26 ku SjGST抗體用于急性血吸蟲病患者血清中循環抗原檢測的暘性率為59.4%.結論 該重組蛋白用于急性血吸蟲病患者血清中抗體的檢測具有良好的免疫反應性,26 ku SjGST抗體對循環抗原的檢測可作為抗體檢測的有效補充.
목적 연구중조항원26 ku일본혈흡충곡광감태-류-전이매(SjGST)급기단극륭항체재혈흡충환자분자진단중적응용.방법 용이순화적중조SjGST항원면역근교계(BALB/c)소서,수주후취면역서비세포,여SP2/0골수류세포진행세포융합,선택성배양기사선출잡교류세포,경유한희석법극륭화,확대배양제비침대중조SjGST항원적단극륭항체세포주.친화층석법순화단극륭항체.매련면역흡부시험(ELISA)검측급성혈흡충병환자화비류행구정상인혈청.결과 성공획득중조단백26 ku SjGST,십이완기류산납-취병희선알응효전영현시여예기상대분자질량대소상부적단백조대.성공획득능구장기분비항중조SjGST단극륭항체적잡교류세포주,ELISA여단백질인적시험균현시잡교류세포배양상청중함유중조SjGST항체.EIASA검측환자혈청결과 표명,26 ku SjGST용우급성혈흡충병환자혈청중항체검측적양성솔위90.6%,26 ku SjGST항체용우급성혈흡충병환자혈청중순배항원검측적양성솔위59.4%.결론 해중조단백용우급성혈흡충병환자혈청중항체적검측구유량호적면역반응성,26 ku SjGST항체대순배항원적검측가작위항체검측적유효보충.
