温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2012年
1期
1-5
,共5页
戴晓春%黄晓燕%周希%高瞻%王本极%张艳丽%杨德业
戴曉春%黃曉燕%週希%高瞻%王本極%張豔麗%楊德業
대효춘%황효연%주희%고첨%왕본겁%장염려%양덕업
解偶联蛋白2%Pax-8%心肌细胞%凋亡%基因敲除小鼠
解偶聯蛋白2%Pax-8%心肌細胞%凋亡%基因敲除小鼠
해우련단백2%Pax-8%심기세포%조망%기인고제소서
目的 建立Pax-8基因敲除模型及Pax -8基因的体外干扰实验,探索心肌细胞中Pax-8基因抑制后解偶联蛋白2(uncouplingprotein 2,UCP2)基因表达的变化.方法 Pax-8基因敲除纯合子小鼠(Pax-8 KO-/-)为实验组,Pax-8基因敲除小鼠杂合子(Pax -8 KO+/-)和野生型(Pax-8KO+/+)为对照组;同时在体外实验的大鼠心肌细胞株中,加入Pax -8基因的小干扰RNA(Pax-8siRNA)为实验组,非特异性siRNA(NC siRNA)组和空白组为对照组.采用RT-PCR和Westernblotting技术测定UCP2的mRNA和蛋白质表达.结果 在Pax-8基因敲除动物模型中,与Pax-8基因敲除小鼠杂合子组和野生型组相比,实验组Pax-8基因敲除小鼠纯合子心脏组织UCP2的mRNA和蛋白表达均上调( P<0.05),而对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);在体外干扰实验中的结果显示,与NC siRNA组和空白对照组比较,Pax-8siRNA组UCP2的mRNA表达和蛋白表达均上调(P<0.05),而NC siRNA组与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 Pax-8基因被抑制后,心肌细胞凋亡增加,UCP2基因表达上调,提示UCP2参与了心肌细胞凋亡的调控.
目的 建立Pax-8基因敲除模型及Pax -8基因的體外榦擾實驗,探索心肌細胞中Pax-8基因抑製後解偶聯蛋白2(uncouplingprotein 2,UCP2)基因錶達的變化.方法 Pax-8基因敲除純閤子小鼠(Pax-8 KO-/-)為實驗組,Pax-8基因敲除小鼠雜閤子(Pax -8 KO+/-)和野生型(Pax-8KO+/+)為對照組;同時在體外實驗的大鼠心肌細胞株中,加入Pax -8基因的小榦擾RNA(Pax-8siRNA)為實驗組,非特異性siRNA(NC siRNA)組和空白組為對照組.採用RT-PCR和Westernblotting技術測定UCP2的mRNA和蛋白質錶達.結果 在Pax-8基因敲除動物模型中,與Pax-8基因敲除小鼠雜閤子組和野生型組相比,實驗組Pax-8基因敲除小鼠純閤子心髒組織UCP2的mRNA和蛋白錶達均上調( P<0.05),而對照組之間差異無統計學意義(P>0.05);在體外榦擾實驗中的結果顯示,與NC siRNA組和空白對照組比較,Pax-8siRNA組UCP2的mRNA錶達和蛋白錶達均上調(P<0.05),而NC siRNA組與空白對照組間差異無統計學意義(P>0.05).結論 Pax-8基因被抑製後,心肌細胞凋亡增加,UCP2基因錶達上調,提示UCP2參與瞭心肌細胞凋亡的調控.
목적 건립Pax-8기인고제모형급Pax -8기인적체외간우실험,탐색심기세포중Pax-8기인억제후해우련단백2(uncouplingprotein 2,UCP2)기인표체적변화.방법 Pax-8기인고제순합자소서(Pax-8 KO-/-)위실험조,Pax-8기인고제소서잡합자(Pax -8 KO+/-)화야생형(Pax-8KO+/+)위대조조;동시재체외실험적대서심기세포주중,가입Pax -8기인적소간우RNA(Pax-8siRNA)위실험조,비특이성siRNA(NC siRNA)조화공백조위대조조.채용RT-PCR화Westernblotting기술측정UCP2적mRNA화단백질표체.결과 재Pax-8기인고제동물모형중,여Pax-8기인고제소서잡합자조화야생형조상비,실험조Pax-8기인고제소서순합자심장조직UCP2적mRNA화단백표체균상조( P<0.05),이대조조지간차이무통계학의의(P>0.05);재체외간우실험중적결과현시,여NC siRNA조화공백대조조비교,Pax-8siRNA조UCP2적mRNA표체화단백표체균상조(P<0.05),이NC siRNA조여공백대조조간차이무통계학의의(P>0.05).결론 Pax-8기인피억제후,심기세포조망증가,UCP2기인표체상조,제시UCP2삼여료심기세포조망적조공.
