眼科
眼科
안과
OPHTHALMOLOGY IN CHINA
2012年
2期
121-126
,共6页
王怡琛%李彬%赵博文%张浩%高飞%张志豹
王怡琛%李彬%趙博文%張浩%高飛%張誌豹
왕이침%리빈%조박문%장호%고비%장지표
O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶%甲基化%表达%视网膜母细胞瘤
O6-甲基鳥嘌呤DNA甲基轉移酶%甲基化%錶達%視網膜母細胞瘤
O6-갑기조표령DNA갑기전이매%갑기화%표체%시망막모세포류
目的 检测视网膜母细胞瘤(RB)中,06-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子区甲基化状态及mRNA、蛋白产物的表达情况,并探讨其与RB临床、组织病理学特征的可能关系.设计 实验研究.研究对象 石蜡包埋RB组织20例,RB细胞系4株(Y79、SO-Rb50、SO-Rb50/VCR 、WERI-RB1).方法 采用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测20例石蜡包埋RB组织及4株RB细胞系MGMT启动子区甲基化状态,并进一步以实时荧光定量PCR及蛋白印迹确认MGMT mRNA、蛋白的表达.收集患者临床资料(如性别、发病年龄等),并对RB组织标本HE、免疫组织化学染色切片进行组织病理学诊断,判断组织病理学特征(如肿瘤侵犯范围、虹膜新生血管等).主要指标 MGMT启动子区甲基化状态,MGMT mRNA及蛋白表达水平,患者临床及组织病理学特征.结果 20例石蜡包埋RB组织标本中,12例(60％ )MGMT启动子区为部分/完全甲基化,余8例(40％)未甲基化,甲基化与未甲基化组的临床及组织病理学指标不具有统计学差异(P＞0.05).Y79、SO-RbS0、SO-Rb50/VCR 3株RB细胞系MGMT启动子区为部分甲基化；WERI-RB1细胞系MGMT启动子区为未甲基化.4株RB细胞系均有不同程度MGMT mRNA及蛋白的表达,WERI-RB1 MGMT mRNA表达水平(1.000±0.040)高于其他3株细胞系(Y79,0.617±-0.026；SO-Rb50,0.356±-0.020;SO-Rb50/VCR,0.389±0.017),差异具有统计学意义(P＜0.05),WERI-RB1 MGMT蛋白表达水平(1.506±0.493)略高于其他3株细胞系(Y79,1.388±0.304;SO-Rb50,1.495±0.212; SO-Rb50/VCR,1.406±0.547),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在RB组织及细胞系中,存在较高的MGMT启动子区甲基化率,MGMT甲基化状态可影响其产物表达水平.
目的 檢測視網膜母細胞瘤(RB)中,06-甲基鳥嘌呤DNA甲基轉移酶(MGMT)基因啟動子區甲基化狀態及mRNA、蛋白產物的錶達情況,併探討其與RB臨床、組織病理學特徵的可能關繫.設計 實驗研究.研究對象 石蠟包埋RB組織20例,RB細胞繫4株(Y79、SO-Rb50、SO-Rb50/VCR 、WERI-RB1).方法 採用甲基化特異性聚閤酶鏈式反應(MSP)檢測20例石蠟包埋RB組織及4株RB細胞繫MGMT啟動子區甲基化狀態,併進一步以實時熒光定量PCR及蛋白印跡確認MGMT mRNA、蛋白的錶達.收集患者臨床資料(如性彆、髮病年齡等),併對RB組織標本HE、免疫組織化學染色切片進行組織病理學診斷,判斷組織病理學特徵(如腫瘤侵犯範圍、虹膜新生血管等).主要指標 MGMT啟動子區甲基化狀態,MGMT mRNA及蛋白錶達水平,患者臨床及組織病理學特徵.結果 20例石蠟包埋RB組織標本中,12例(60％ )MGMT啟動子區為部分/完全甲基化,餘8例(40％)未甲基化,甲基化與未甲基化組的臨床及組織病理學指標不具有統計學差異(P＞0.05).Y79、SO-RbS0、SO-Rb50/VCR 3株RB細胞繫MGMT啟動子區為部分甲基化；WERI-RB1細胞繫MGMT啟動子區為未甲基化.4株RB細胞繫均有不同程度MGMT mRNA及蛋白的錶達,WERI-RB1 MGMT mRNA錶達水平(1.000±0.040)高于其他3株細胞繫(Y79,0.617±-0.026；SO-Rb50,0.356±-0.020;SO-Rb50/VCR,0.389±0.017),差異具有統計學意義(P＜0.05),WERI-RB1 MGMT蛋白錶達水平(1.506±0.493)略高于其他3株細胞繫(Y79,1.388±0.304;SO-Rb50,1.495±0.212; SO-Rb50/VCR,1.406±0.547),差異無統計學意義(P＞0.05).結論 在RB組織及細胞繫中,存在較高的MGMT啟動子區甲基化率,MGMT甲基化狀態可影響其產物錶達水平.
목적 검측시망막모세포류(RB)중,06-갑기조표령DNA갑기전이매(MGMT)기인계동자구갑기화상태급mRNA、단백산물적표체정황,병탐토기여RB림상、조직병이학특정적가능관계.설계 실험연구.연구대상 석사포매RB조직20례,RB세포계4주(Y79、SO-Rb50、SO-Rb50/VCR 、WERI-RB1).방법 채용갑기화특이성취합매련식반응(MSP)검측20례석사포매RB조직급4주RB세포계MGMT계동자구갑기화상태,병진일보이실시형광정량PCR급단백인적학인MGMT mRNA、단백적표체.수집환자림상자료(여성별、발병년령등),병대RB조직표본HE、면역조직화학염색절편진행조직병이학진단,판단조직병이학특정(여종류침범범위、홍막신생혈관등).주요지표 MGMT계동자구갑기화상태,MGMT mRNA급단백표체수평,환자림상급조직병이학특정.결과 20례석사포매RB조직표본중,12례(60％ )MGMT계동자구위부분/완전갑기화,여8례(40％)미갑기화,갑기화여미갑기화조적림상급조직병이학지표불구유통계학차이(P＞0.05).Y79、SO-RbS0、SO-Rb50/VCR 3주RB세포계MGMT계동자구위부분갑기화；WERI-RB1세포계MGMT계동자구위미갑기화.4주RB세포계균유불동정도MGMT mRNA급단백적표체,WERI-RB1 MGMT mRNA표체수평(1.000±0.040)고우기타3주세포계(Y79,0.617±-0.026；SO-Rb50,0.356±-0.020;SO-Rb50/VCR,0.389±0.017),차이구유통계학의의(P＜0.05),WERI-RB1 MGMT단백표체수평(1.506±0.493)략고우기타3주세포계(Y79,1.388±0.304;SO-Rb50,1.495±0.212; SO-Rb50/VCR,1.406±0.547),차이무통계학의의(P＞0.05).결론 재RB조직급세포계중,존재교고적MGMT계동자구갑기화솔,MGMT갑기화상태가영향기산물표체수평.
