眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2008年
5期
338-342
,共5页
金玮%杨安怀%邢怡桥%梅海峰%项奕%陈长征
金瑋%楊安懷%邢怡橋%梅海峰%項奕%陳長徵
금위%양안부%형이교%매해봉%항혁%진장정
脐血间充质干细胞%牛磺酸诱导%感光细胞%生物学特性
臍血間充質榦細胞%牛磺痠誘導%感光細胞%生物學特性
제혈간충질간세포%우광산유도%감광세포%생물학특성
目的 探讨牛磺酸诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)分化为感光细胞的实验条件,并鉴定其生物学特性.方法 从胎儿脐血中分离出MSCs进行原代培养,待细胞融合时,按1:2的比例进行传代.取第3代脐血MSCs用流式细胞仪检测细胞周期和细胞表面抗原CD90、CD29、CD34、CD44、CD45的表达.另取第3代脐血MSCs在最小必需培养基继续培养8～10 d,应用免疫细胞化学法观察神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白2(MAP2)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、视紫红质(RHOS)、蛋白激酶C(PKC)、巢蛋白(Nestin)的表达.结果 MSCs培养5～7 d后有间充质样细胞贴壁,3～4周后细胞生长达80%～90%融合,形态学类似骨髓源性MSCs.连续传5代,增生能力未见明显减弱.脐血MSCs的大部分细胞(>90%)处于G0/G.期,可表达MSCs的相关抗原CD29、CD44、CD90,但不表达CD34、CD45.经牛磺酸体外诱导后的脐血MSCs(71.4±11.1)%中等强度以上表达NSE,(21.0±7.8)%的细胞表达Nestin,(30.2±8.9)%表达RHOS,而不表达GFAP、PKC、MAP2.无牛磺酸诱导组的脐血MSCs仅(5.8±2.3)%表达NSE,其他抗原未见表达.结论 脐血的MSCs可在体外纯化增生,经牛磺酸体外诱导能使部分MSCs向感光细胞或表达RHOS的细胞分化.
目的 探討牛磺痠誘導人臍血間充質榦細胞(MSCs)分化為感光細胞的實驗條件,併鑒定其生物學特性.方法 從胎兒臍血中分離齣MSCs進行原代培養,待細胞融閤時,按1:2的比例進行傳代.取第3代臍血MSCs用流式細胞儀檢測細胞週期和細胞錶麵抗原CD90、CD29、CD34、CD44、CD45的錶達.另取第3代臍血MSCs在最小必需培養基繼續培養8～10 d,應用免疫細胞化學法觀察神經元特異性烯醇化酶(NSE)、微管相關蛋白2(MAP2)、神經膠質纖維痠性蛋白(GFAP)、視紫紅質(RHOS)、蛋白激酶C(PKC)、巢蛋白(Nestin)的錶達.結果 MSCs培養5～7 d後有間充質樣細胞貼壁,3～4週後細胞生長達80%～90%融閤,形態學類似骨髓源性MSCs.連續傳5代,增生能力未見明顯減弱.臍血MSCs的大部分細胞(>90%)處于G0/G.期,可錶達MSCs的相關抗原CD29、CD44、CD90,但不錶達CD34、CD45.經牛磺痠體外誘導後的臍血MSCs(71.4±11.1)%中等彊度以上錶達NSE,(21.0±7.8)%的細胞錶達Nestin,(30.2±8.9)%錶達RHOS,而不錶達GFAP、PKC、MAP2.無牛磺痠誘導組的臍血MSCs僅(5.8±2.3)%錶達NSE,其他抗原未見錶達.結論 臍血的MSCs可在體外純化增生,經牛磺痠體外誘導能使部分MSCs嚮感光細胞或錶達RHOS的細胞分化.
목적 탐토우광산유도인제혈간충질간세포(MSCs)분화위감광세포적실험조건,병감정기생물학특성.방법 종태인제혈중분리출MSCs진행원대배양,대세포융합시,안1:2적비례진행전대.취제3대제혈MSCs용류식세포의검측세포주기화세포표면항원CD90、CD29、CD34、CD44、CD45적표체.령취제3대제혈MSCs재최소필수배양기계속배양8～10 d,응용면역세포화학법관찰신경원특이성희순화매(NSE)、미관상관단백2(MAP2)、신경효질섬유산성단백(GFAP)、시자홍질(RHOS)、단백격매C(PKC)、소단백(Nestin)적표체.결과 MSCs배양5～7 d후유간충질양세포첩벽,3～4주후세포생장체80%～90%융합,형태학유사골수원성MSCs.련속전5대,증생능력미견명현감약.제혈MSCs적대부분세포(>90%)처우G0/G.기,가표체MSCs적상관항원CD29、CD44、CD90,단불표체CD34、CD45.경우광산체외유도후적제혈MSCs(71.4±11.1)%중등강도이상표체NSE,(21.0±7.8)%적세포표체Nestin,(30.2±8.9)%표체RHOS,이불표체GFAP、PKC、MAP2.무우광산유도조적제혈MSCs부(5.8±2.3)%표체NSE,기타항원미견표체.결론 제혈적MSCs가재체외순화증생,경우광산체외유도능사부분MSCs향감광세포혹표체RHOS적세포분화.
