植物学通报
植物學通報
식물학통보
CHINESE BULLETIN OF BOTANY
2006年
6期
634-641
,共8页
王小行%彭峰%牛冬云%李钢%陈放
王小行%彭峰%牛鼕雲%李鋼%陳放
왕소행%팽봉%우동운%리강%진방
脂酶%麻疯树%简并引物%蛋白质结构
脂酶%痳瘋樹%簡併引物%蛋白質結構
지매%마풍수%간병인물%단백질결구
脂酶(Lipase,EC3.1.1.3)是普遍应用于皮革、饲料及生物柴油工业的工业酶制剂,具有广泛的应用价值.目前对植物来源的脂酶研究较少.本研究用在生物柴油中具有应用前景的油料植物--麻疯树(Jatropha curcas)作为研究对象,克隆了该物种的脂酶基因(JcLIP).通过多序列比对并结合物种的亲缘关系设计了具有较高特异性的简并引物,通过使用RT-PCR和lRACE技术,最终获得了麻疯树脂酶基因的全长序列并成功地在大肠杆菌中表达,酶活测定结果表明,麻疯树脂酶在大肠杆菌中表达在包涵体中,但是能产生具有活力的蛋白质,酶活约为0.8 U·mL-1.结构预测和比较表明,JcLIP蛋白质具有脂酶的结构核心和催化活性中心,而在非核心区具有较毛霉脂酶更多的插入和随机卷曲,这可能是决定二者之间酶活差异的重要原因.
脂酶(Lipase,EC3.1.1.3)是普遍應用于皮革、飼料及生物柴油工業的工業酶製劑,具有廣汎的應用價值.目前對植物來源的脂酶研究較少.本研究用在生物柴油中具有應用前景的油料植物--痳瘋樹(Jatropha curcas)作為研究對象,剋隆瞭該物種的脂酶基因(JcLIP).通過多序列比對併結閤物種的親緣關繫設計瞭具有較高特異性的簡併引物,通過使用RT-PCR和lRACE技術,最終穫得瞭痳瘋樹脂酶基因的全長序列併成功地在大腸桿菌中錶達,酶活測定結果錶明,痳瘋樹脂酶在大腸桿菌中錶達在包涵體中,但是能產生具有活力的蛋白質,酶活約為0.8 U·mL-1.結構預測和比較錶明,JcLIP蛋白質具有脂酶的結構覈心和催化活性中心,而在非覈心區具有較毛黴脂酶更多的插入和隨機捲麯,這可能是決定二者之間酶活差異的重要原因.
지매(Lipase,EC3.1.1.3)시보편응용우피혁、사료급생물시유공업적공업매제제,구유엄범적응용개치.목전대식물래원적지매연구교소.본연구용재생물시유중구유응용전경적유료식물--마풍수(Jatropha curcas)작위연구대상,극륭료해물충적지매기인(JcLIP).통과다서렬비대병결합물충적친연관계설계료구유교고특이성적간병인물,통과사용RT-PCR화lRACE기술,최종획득료마풍수지매기인적전장서렬병성공지재대장간균중표체,매활측정결과표명,마풍수지매재대장간균중표체재포함체중,단시능산생구유활력적단백질,매활약위0.8 U·mL-1.결구예측화비교표명,JcLIP단백질구유지매적결구핵심화최화활성중심,이재비핵심구구유교모매지매경다적삽입화수궤권곡,저가능시결정이자지간매활차이적중요원인.
