生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
38-40
,共3页
展德文%张玉静%王艳春%孙兆增%刘纯杰%张兆山
展德文%張玉靜%王豔春%孫兆增%劉純傑%張兆山
전덕문%장옥정%왕염춘%손조증%류순걸%장조산
小鼠%层粘连蛋白α5%LG3组件%表达%纯化
小鼠%層粘連蛋白α5%LG3組件%錶達%純化
소서%층점련단백α5%LG3조건%표체%순화
目的:用原核表达的方法获得带有6×His标记的小鼠层粘连蛋白α5 LG3组件的重组蛋白.方法与结果:从小鼠心肌组织中提取总RNA,利用RT-PCR扩增出小鼠层粘连蛋白α5 LG3组件的cDNA片段,并与pET-28a载体连接,构建重组表达质粒pET-LG3,限制性酶切分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为小鼠层粘连蛋白α5 LG3组件基因的成熟肽编码序列.用IPTG诱导,LG3蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了表达,并经Ni-NTA层析柱获得纯化.结论:层粘连蛋白α5 LG3组件的重组蛋白得到表达和纯化,为后续相关研究奠定了基础.
目的:用原覈錶達的方法穫得帶有6×His標記的小鼠層粘連蛋白α5 LG3組件的重組蛋白.方法與結果:從小鼠心肌組織中提取總RNA,利用RT-PCR擴增齣小鼠層粘連蛋白α5 LG3組件的cDNA片段,併與pET-28a載體連接,構建重組錶達質粒pET-LG3,限製性酶切分析和DNA序列測定均證實該剋隆插入片段為小鼠層粘連蛋白α5 LG3組件基因的成熟肽編碼序列.用IPTG誘導,LG3蛋白在大腸桿菌BL21(DE3)中得到瞭錶達,併經Ni-NTA層析柱穫得純化.結論:層粘連蛋白α5 LG3組件的重組蛋白得到錶達和純化,為後續相關研究奠定瞭基礎.
목적:용원핵표체적방법획득대유6×His표기적소서층점련단백α5 LG3조건적중조단백.방법여결과:종소서심기조직중제취총RNA,이용RT-PCR확증출소서층점련단백α5 LG3조건적cDNA편단,병여pET-28a재체련접,구건중조표체질립pET-LG3,한제성매절분석화DNA서렬측정균증실해극륭삽입편단위소서층점련단백α5 LG3조건기인적성숙태편마서렬.용IPTG유도,LG3단백재대장간균BL21(DE3)중득도료표체,병경Ni-NTA층석주획득순화.결론:층점련단백α5 LG3조건적중조단백득도표체화순화,위후속상관연구전정료기출.
