天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2008年
4期
276-279,后插2
,共5页
李圃%李冬田%尹冰楠%汤华
李圃%李鼕田%尹冰楠%湯華
리포%리동전%윤빙남%탕화
宫颈肿瘤%胞嘧啶%脱氨酶类%内皮抑素类%重组蛋白质类%腺病毒科%基因
宮頸腫瘤%胞嘧啶%脫氨酶類%內皮抑素類%重組蛋白質類%腺病毒科%基因
궁경종류%포밀정%탈안매류%내피억소류%중조단백질류%선병독과%기인
目的:构建含CDglyES融合基因的重组腺病毒,并观察其在体外对宫颈癌细胞的直接抑瘤作用和对血管内皮细胞的抑制作用.方法:用PCR方法扩增CD基因和glyES基因片段,构建成腺病毒穿梭质粒pAdCDglyES.用细菌内同源重组方法与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1重组构建出重组腺病毒质粒prAdCDglyES.经脂质体介导转染293细胞,进而扩增获取重组腺病毒rAdCDglyES.用MTT法检测rAdCDglyES/5-FC系统对宫颈癌细胞株HeLa细胞的生长抑制率及其表达产物对脐静脉血管内皮细胞ECV-304增殖的影响.结果:纯化的rAdCDglyES滴度为1×10.3-TCID50/L,对HeLa细胞的生长抑制率达(84.1±7.3)%,高于对照rAd-LacZ/5-FC系统的(23.1±14.1)%,差异有统计学意义(P＜0.01).浓缩的转染了rAdCDglyES的细胞培养上清液对ECV-304细胞增殖的抑制率为(77.7±1.8)%,高于同样浓缩的转染rAd-CD细胞培养上清液抑制率的(22.9±9.7)%,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:rAdCDglyES在体外对宫颈癌具有直接和间接抑瘤作用.
目的:構建含CDglyES融閤基因的重組腺病毒,併觀察其在體外對宮頸癌細胞的直接抑瘤作用和對血管內皮細胞的抑製作用.方法:用PCR方法擴增CD基因和glyES基因片段,構建成腺病毒穿梭質粒pAdCDglyES.用細菌內同源重組方法與腺病毒骨架質粒pAdEasy-1重組構建齣重組腺病毒質粒prAdCDglyES.經脂質體介導轉染293細胞,進而擴增穫取重組腺病毒rAdCDglyES.用MTT法檢測rAdCDglyES/5-FC繫統對宮頸癌細胞株HeLa細胞的生長抑製率及其錶達產物對臍靜脈血管內皮細胞ECV-304增殖的影響.結果:純化的rAdCDglyES滴度為1×10.3-TCID50/L,對HeLa細胞的生長抑製率達(84.1±7.3)%,高于對照rAd-LacZ/5-FC繫統的(23.1±14.1)%,差異有統計學意義(P＜0.01).濃縮的轉染瞭rAdCDglyES的細胞培養上清液對ECV-304細胞增殖的抑製率為(77.7±1.8)%,高于同樣濃縮的轉染rAd-CD細胞培養上清液抑製率的(22.9±9.7)%,差異有統計學意義(P＜0.01).結論:rAdCDglyES在體外對宮頸癌具有直接和間接抑瘤作用.
목적:구건함CDglyES융합기인적중조선병독,병관찰기재체외대궁경암세포적직접억류작용화대혈관내피세포적억제작용.방법:용PCR방법확증CD기인화glyES기인편단,구건성선병독천사질립pAdCDglyES.용세균내동원중조방법여선병독골가질립pAdEasy-1중조구건출중조선병독질립prAdCDglyES.경지질체개도전염293세포,진이확증획취중조선병독rAdCDglyES.용MTT법검측rAdCDglyES/5-FC계통대궁경암세포주HeLa세포적생장억제솔급기표체산물대제정맥혈관내피세포ECV-304증식적영향.결과:순화적rAdCDglyES적도위1×10.3-TCID50/L,대HeLa세포적생장억제솔체(84.1±7.3)%,고우대조rAd-LacZ/5-FC계통적(23.1±14.1)%,차이유통계학의의(P＜0.01).농축적전염료rAdCDglyES적세포배양상청액대ECV-304세포증식적억제솔위(77.7±1.8)%,고우동양농축적전염rAd-CD세포배양상청액억제솔적(22.9±9.7)%,차이유통계학의의(P＜0.01).결론:rAdCDglyES재체외대궁경암구유직접화간접억류작용.
