中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2008年
8期
605-609
,共5页
耿艺介%高世同%黄达娜%庾蕾%张仁利
耿藝介%高世同%黃達娜%庾蕾%張仁利
경예개%고세동%황체나%유뢰%장인리
淡色库蚊%白纹伊蚊%嗜人按蚊%rDNA-ITS2
淡色庫蚊%白紋伊蚊%嗜人按蚊%rDNA-ITS2
담색고문%백문이문%기인안문%rDNA-ITS2
目的 建立利用核糖体DNA第二内转录间隔区(rDNA-ITS2)诊断性序列鉴别蚊媒的分子生物学方法. 方法 根据淡色库蚊、白纹伊蚊、嗜人按蚊rDNA-ITS2基因两侧的5.8S和28S保守区设计诊断性引物,进行3种蚊虫的rDNA-ITS2克隆鉴定,并利用其rDNA-ITS2特征进行现场蚊虫的鉴别. 结果 诊断性引物对于淡色库蚊、白纹伊蚊、嗜人按蚊DNA模板的扩增产物分别为440、514和558 bp,3种蚊虫阳性克隆的测序结果与GenBank-blast相应蚊种rDNA-ITS2序列的同源性均为99%.用Biosept、DNAstar等软件分别分析发现各蚊虫克隆的个体间存在一定程度的单核苷酸多态性(SNP).将现场采集的蚊虫诊断性引物扩增产物进行阳性克隆进行序列测定和分析,显示与淡色库蚊阳性对照的一致性为99%;与GenBank中淡色库蚊rDNA-ITS2基因的同源性为99%. 结论 通过对淡色库蚊、白纹伊蚊、嗜人按蚊核糖体DNA第二内转录间隔区(rDNA-ITS2)基因的序列分析,表明3种蚊媒的rDNA-ITS2基因具有可鉴别的种属特异性.利用同一体系的共享引物扩增,可以建立适用于3种蚊媒的现场鉴定方法.
目的 建立利用覈糖體DNA第二內轉錄間隔區(rDNA-ITS2)診斷性序列鑒彆蚊媒的分子生物學方法. 方法 根據淡色庫蚊、白紋伊蚊、嗜人按蚊rDNA-ITS2基因兩側的5.8S和28S保守區設計診斷性引物,進行3種蚊蟲的rDNA-ITS2剋隆鑒定,併利用其rDNA-ITS2特徵進行現場蚊蟲的鑒彆. 結果 診斷性引物對于淡色庫蚊、白紋伊蚊、嗜人按蚊DNA模闆的擴增產物分彆為440、514和558 bp,3種蚊蟲暘性剋隆的測序結果與GenBank-blast相應蚊種rDNA-ITS2序列的同源性均為99%.用Biosept、DNAstar等軟件分彆分析髮現各蚊蟲剋隆的箇體間存在一定程度的單覈苷痠多態性(SNP).將現場採集的蚊蟲診斷性引物擴增產物進行暘性剋隆進行序列測定和分析,顯示與淡色庫蚊暘性對照的一緻性為99%;與GenBank中淡色庫蚊rDNA-ITS2基因的同源性為99%. 結論 通過對淡色庫蚊、白紋伊蚊、嗜人按蚊覈糖體DNA第二內轉錄間隔區(rDNA-ITS2)基因的序列分析,錶明3種蚊媒的rDNA-ITS2基因具有可鑒彆的種屬特異性.利用同一體繫的共享引物擴增,可以建立適用于3種蚊媒的現場鑒定方法.
목적 건립이용핵당체DNA제이내전록간격구(rDNA-ITS2)진단성서렬감별문매적분자생물학방법. 방법 근거담색고문、백문이문、기인안문rDNA-ITS2기인량측적5.8S화28S보수구설계진단성인물,진행3충문충적rDNA-ITS2극륭감정,병이용기rDNA-ITS2특정진행현장문충적감별. 결과 진단성인물대우담색고문、백문이문、기인안문DNA모판적확증산물분별위440、514화558 bp,3충문충양성극륭적측서결과여GenBank-blast상응문충rDNA-ITS2서렬적동원성균위99%.용Biosept、DNAstar등연건분별분석발현각문충극륭적개체간존재일정정도적단핵감산다태성(SNP).장현장채집적문충진단성인물확증산물진행양성극륭진행서렬측정화분석,현시여담색고문양성대조적일치성위99%;여GenBank중담색고문rDNA-ITS2기인적동원성위99%. 결론 통과대담색고문、백문이문、기인안문핵당체DNA제이내전록간격구(rDNA-ITS2)기인적서렬분석,표명3충문매적rDNA-ITS2기인구유가감별적충속특이성.이용동일체계적공향인물확증,가이건립괄용우3충문매적현장감정방법.
