中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2011年
7期
561-567
,共7页
李白翎%张冠鑫%侯霄雷%袁扬%刘晓红%龚德军%黄盛东
李白翎%張冠鑫%侯霄雷%袁颺%劉曉紅%龔德軍%黃盛東
리백령%장관흠%후소뢰%원양%류효홍%공덕군%황성동
血管生成素-2%A549细胞株%腺相关病毒%RNA干扰
血管生成素-2%A549細胞株%腺相關病毒%RNA榦擾
혈관생성소-2%A549세포주%선상관병독%RNA간우
背景与目的促血管生成素-2(Ang-2)是一类调节血管生成的重要细胞因子,与肿瘤的发生发展有密切的联系.本研究通过腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)抑制肺腺癌细胞A549Ang-2的表达,观察其对癌细胞生物学特性的影响.方法构建H1启动子驱动的表达针对Ang-2的小干扰RNA(siRNA)重组腺相关病毒(AAV-Ang-2shRNA),转染A549细胞,同时以正常A549细胞及其转染空病毒(AAV-Null)的A549细胞作为对照,观察RNAi沉默Ang-2表达在体外及体内对A549细胞生长、致瘤、增殖、凋亡及肿瘤微血管密度的影响.结果体外实验结果表明重组腺相关病毒转染A549细胞48 h后Ang-2蛋白表达比对照组明显降低(P＜0.001)；细胞生长明显减慢(P＜0.001).RNA干扰后A549细胞细胞周期分析结果提示A549细胞对照组、AAV-Null对照组和AAV-Ang-2thRNA验组的增殖指数(proliferation index,PI)分别为0.51±0.43、0.48±0.29和0.26±0.31.AAV-Ang-2shRNA验组与对照组比较,PI明显减少(P=0.001).体内实验结果表明,AAV-Ang-2shRNA实验组在胸腺缺陷小鼠成瘤体积、瘤质量均明显低于两对照组(P＜0.01).各组微血管密度分析结果分别为46.4+13.1、44.2+13.6和34.9±12.8；AAV-Ang-2shRNA实验组肿瘤组织内新生血管数目明显低于对照组(P＜0.001).各组凋亡指数(apoptosisindex,AI)分别为(5.98±3.11)％、(7.51±4.42)％及(17.06±7.43)％.AAV-Ang-2shRNA组比PBS组、AAV-Null组凋亡百分率明显增高(P=0.005,P=0.007).各组细胞增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)阳性表达率分别为(92.75+9.7)％、(85.8±11.8)％、(69.8+16.5)％；AAV-Ang-2shRNA组PCNA指数低于两对照组(P=0.014,P=0.021).结论腺相关病毒介导的siRNA表达能明显抑制A549细胞中Ang-2的表达,减慢肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长.
揹景與目的促血管生成素-2(Ang-2)是一類調節血管生成的重要細胞因子,與腫瘤的髮生髮展有密切的聯繫.本研究通過腺相關病毒(adeno-associated virus,AAV)介導的RNA榦擾(RNAinterference,RNAi)抑製肺腺癌細胞A549Ang-2的錶達,觀察其對癌細胞生物學特性的影響.方法構建H1啟動子驅動的錶達針對Ang-2的小榦擾RNA(siRNA)重組腺相關病毒(AAV-Ang-2shRNA),轉染A549細胞,同時以正常A549細胞及其轉染空病毒(AAV-Null)的A549細胞作為對照,觀察RNAi沉默Ang-2錶達在體外及體內對A549細胞生長、緻瘤、增殖、凋亡及腫瘤微血管密度的影響.結果體外實驗結果錶明重組腺相關病毒轉染A549細胞48 h後Ang-2蛋白錶達比對照組明顯降低(P＜0.001)；細胞生長明顯減慢(P＜0.001).RNA榦擾後A549細胞細胞週期分析結果提示A549細胞對照組、AAV-Null對照組和AAV-Ang-2thRNA驗組的增殖指數(proliferation index,PI)分彆為0.51±0.43、0.48±0.29和0.26±0.31.AAV-Ang-2shRNA驗組與對照組比較,PI明顯減少(P=0.001).體內實驗結果錶明,AAV-Ang-2shRNA實驗組在胸腺缺陷小鼠成瘤體積、瘤質量均明顯低于兩對照組(P＜0.01).各組微血管密度分析結果分彆為46.4+13.1、44.2+13.6和34.9±12.8；AAV-Ang-2shRNA實驗組腫瘤組織內新生血管數目明顯低于對照組(P＜0.001).各組凋亡指數(apoptosisindex,AI)分彆為(5.98±3.11)％、(7.51±4.42)％及(17.06±7.43)％.AAV-Ang-2shRNA組比PBS組、AAV-Null組凋亡百分率明顯增高(P=0.005,P=0.007).各組細胞增殖覈抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)暘性錶達率分彆為(92.75+9.7)％、(85.8±11.8)％、(69.8+16.5)％；AAV-Ang-2shRNA組PCNA指數低于兩對照組(P=0.014,P=0.021).結論腺相關病毒介導的siRNA錶達能明顯抑製A549細胞中Ang-2的錶達,減慢腫瘤細胞的增殖,促進腫瘤細胞凋亡,抑製腫瘤生長.
배경여목적촉혈관생성소-2(Ang-2)시일류조절혈관생성적중요세포인자,여종류적발생발전유밀절적련계.본연구통과선상관병독(adeno-associated virus,AAV)개도적RNA간우(RNAinterference,RNAi)억제폐선암세포A549Ang-2적표체,관찰기대암세포생물학특성적영향.방법구건H1계동자구동적표체침대Ang-2적소간우RNA(siRNA)중조선상관병독(AAV-Ang-2shRNA),전염A549세포,동시이정상A549세포급기전염공병독(AAV-Null)적A549세포작위대조,관찰RNAi침묵Ang-2표체재체외급체내대A549세포생장、치류、증식、조망급종류미혈관밀도적영향.결과체외실험결과표명중조선상관병독전염A549세포48 h후Ang-2단백표체비대조조명현강저(P＜0.001)；세포생장명현감만(P＜0.001).RNA간우후A549세포세포주기분석결과제시A549세포대조조、AAV-Null대조조화AAV-Ang-2thRNA험조적증식지수(proliferation index,PI)분별위0.51±0.43、0.48±0.29화0.26±0.31.AAV-Ang-2shRNA험조여대조조비교,PI명현감소(P=0.001).체내실험결과표명,AAV-Ang-2shRNA실험조재흉선결함소서성류체적、류질량균명현저우량대조조(P＜0.01).각조미혈관밀도분석결과분별위46.4+13.1、44.2+13.6화34.9±12.8；AAV-Ang-2shRNA실험조종류조직내신생혈관수목명현저우대조조(P＜0.001).각조조망지수(apoptosisindex,AI)분별위(5.98±3.11)％、(7.51±4.42)％급(17.06±7.43)％.AAV-Ang-2shRNA조비PBS조、AAV-Null조조망백분솔명현증고(P=0.005,P=0.007).각조세포증식핵항원(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)양성표체솔분별위(92.75+9.7)％、(85.8±11.8)％、(69.8+16.5)％；AAV-Ang-2shRNA조PCNA지수저우량대조조(P=0.014,P=0.021).결론선상관병독개도적siRNA표체능명현억제A549세포중Ang-2적표체,감만종류세포적증식,촉진종류세포조망,억제종류생장.
